24小时热门版块排行榜    

查看: 2036  |  回复: 9

为你学习

铜虫 (初入文坛)

[求助] 我最近跑了一块page凝胶电泳 那位高手帮忙分析下为什么条带会出现这种问题?

我最近跑了一块page凝胶电泳  那位高手帮忙分析下为什么条带会出现这种问题?
  圆圈里的电泳道理为什么会是黑的   条带为什么有深有浅?

IMG_0326.JPG



[ Last edited by 为你学习 on 2012-11-29 at 17:49 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

好好学习,努力工作
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shucanwei

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
请问你的样品是什么?怎么获得的?加样量多少?初步判断怀疑是样品的问题。颜色深浅是浓度大小有关。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
唯以一人治天下,不以天下奉一人。
2楼2012-11-29 18:05:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

为你学习

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by shucanwei at 2012-11-29 18:05:49
请问你的样品是什么?怎么获得的?加样量多少?初步判断怀疑是样品的问题。颜色深浅是浓度大小有关。

棉花DNA 扩增玩以后上的样  上样量3ul   体系是10ul的  模板1ul buffer 1ul  上下游引物各0.5ul taq 0.5ul ddH2O6.5ul   退火温度55°  电泳电压 200v 电流400ma 跑出来就这样  会是是退火温度的问题吗? 主要是想问为什么条带会是那么黑,不清楚。谢谢!
好好学习,努力工作
3楼2012-11-29 18:20:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shucanwei

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

我也预到这种情况。也咨询了相关公司,原因可能是产物的浓度过大。也有可能是扩增体系中残留的酶引起的。酶为蛋白。也可能是模板浓度太高。     建议将产物纯化后稀不同浓度电泳。或就是降低模板的浓度,将模板稀释到一纳克再扩增。另外,请问您的产物预计是单一的带吗?有没有琼脂糖电泳过?

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
唯以一人治天下,不以天下奉一人。
4楼2012-11-30 08:25:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shucanwei

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

还有一个关键点是银染的步骤。可能显影时间太久。你用氢氧化钠还是碳酸钠显影?

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
唯以一人治天下,不以天下奉一人。
5楼2012-11-30 08:28:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shucanwei

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

请下次点一个适合page胶的marker。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
唯以一人治天下,不以天下奉一人。
6楼2012-11-30 08:30:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

我做分子实验

铁虫 (初入文坛)

个人觉得是银染过深
我要创业~
7楼2012-12-02 13:20:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

huzhen1990

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

pcr循环次数过多或者模板浓度太高了
8楼2012-12-02 18:18:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhuxxshz

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

pcr循环次数过多或者模板浓度太高了,还有银染时间有点长了
9楼2012-12-02 20:13:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

黑白VS兔子

木虫 (著名写手)

引用回帖:
8楼: Originally posted by huzhen1990 at 2012-12-02 18:18:49
pcr循环次数过多或者模板浓度太高了

请问一下,您说的模板浓度太高是什么意思啊?
10楼2013-07-24 19:03:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 为你学习 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 5/250 2026-08-29 09:49 by G6APbkg8SA6w
[考研] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 5/250 2026-08-29 09:39 by G6APbkg8SA6w
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 7/350 2026-08-29 09:38 by G6APbkg8SA6w
[找工作] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 5/250 2026-08-29 09:28 by G6APbkg8SA6w
[基金申请] 为什么资助数各大高校都创新高,自己申请怎么就这么难 +12 Kittylucky 2026-08-27 13/650 2026-08-29 00:04 by superceng
[基金申请] 国自然面上复盘~欢迎讨论 (金币+15) +13 晴天加油 2026-08-26 14/700 2026-08-28 18:36 by huagongfeihu
[基金申请] 哪位高人中了,把查询到的截图贴出来让我看看,让我长长见识 +5 yuleib84 2026-08-26 6/300 2026-08-28 00:02 by yudaoqian88
[基金申请] 面上合作单位盖章 +5 ssyjh 2026-08-27 5/250 2026-08-27 20:50 by gdfollow
[基金申请] 申请删除本帖 +6 lyz123lyz 2026-08-27 7/350 2026-08-27 17:31 by 宁静致远sy
[文学芳草园] 梦想 +3 myrtle 2026-08-26 3/150 2026-08-27 10:01 by angelyueyi
[基金申请] 为什么 国际(地区)合作与交流项目 没有放榜? 10+3 majunge000 2026-08-26 11/550 2026-08-27 08:42 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 2026年的国家社科基金项目通讯评审的新规则与新动向、新挑战 +7 process2012 2026-08-23 10/500 2026-08-26 19:23 by hmhminy
[基金申请] 范进中举一文的中心思想 +9 炎黄贵胄 2026-08-22 10/500 2026-08-26 15:40 by semaglutide
[基金申请] 2026年8月25日国自然放榜前突然收到列入评审专家邮件,有关系吗? +25 木水思豆 2026-08-25 28/1400 2026-08-26 14:53 by draco1987
[基金申请] 国合里面能看到了 +7 一怀馨秋 2026-08-26 7/350 2026-08-26 11:23 by zhaosm1982
[基金申请] 项目信息和经费信息在系统里都可以看到了 +6 wittyboy 2026-08-26 14/700 2026-08-26 10:55 by wittyboy
[基金申请] 牛来!米来!面来! +8 beefly 2026-08-26 8/400 2026-08-26 08:37 by xuzhipiao
[基金申请] 在坚冰还盖着北海的时候,我看到了怒放的梅花。 (金币+10) +6 ziyangfang 2026-08-25 9/450 2026-08-25 20:26 by huagongfeihu
[基金申请] 没有任何消息-是不是就凉了 +9 图啦图啦 2026-08-24 10/500 2026-08-25 11:59 by 南海小哥
[教师之家] 跳槽后在研项目怎么办? +5 简单化xn 2026-08-22 10/500 2026-08-23 12:38 by 简单化xn
信息提示
请填处理意见