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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 基因克隆问题
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11720497

新虫 (初入文坛)

[求助] 基因克隆问题

老师安排做一种植物A中的a基因的克隆，但是这个a基因在A中没有报道过任何信息，只能通过其他物种B、C中a基因序列保守序列设计兼并来P，但是老是P不出来。最近我用植物B中a基因的ORF设计引物来扩A的模板，结果P出来了条带，请问各位大侠，我接下来该怎么做？
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1楼 2012-11-27 10:43:46
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西农种子

木虫 (著名写手)

青虫还是酱爆的好
引用回帖:
5楼: Originally posted by 11720497 at 2012-11-27 10:54:31
我那样做了，可是NCBI比对发现，和B中a基因相似度99%，怎么会这样啊...

首先你要求证：相近报道的物种之间，是不是基因保守性很强。人体，动物，植物之间有些基因的保守性的确可以达到很高，比如泛素。
其次，如果是保守性不强。你又怀疑结果，推荐你用试剂盒做RACE。然后将得到的序列测序。
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快来粉奶牛的围脖~~http://weibo.com/i/zhaoyuan913
6楼2012-11-27 11:00:55
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11720497

新虫 (初入文坛)
本人新申请的号，求各位大侠帮帮忙啊
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2楼2012-11-27 10:47:06
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西农种子

木虫 (著名写手)

青虫还是酱爆的好

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
连接到载体上测序。测序回来以后与类似物种进行序列比对。
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快来粉奶牛的围脖~~http://weibo.com/i/zhaoyuan913
3楼2012-11-27 10:50:46
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11720497

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 11720497 at 2012-11-27 10:47:06
本人新申请的号，求各位大侠帮帮忙啊

我那样做了，可是NCBI比对发现，和B中a基因相似度99%，怎么会这样啊
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4楼2012-11-27 10:53:03
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