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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】基因克隆问题求助！
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hnndpt

铁虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】基因克隆问题求助！ 已有6人参与

做课题要克隆棉花的一个基因，但目前没有在文章中查到与此基因相关的序列，请问还有办法克隆吗？

此外，老师让从Datebase中查找与此相关的序列。，请问怎么查呢，谁会的话可以教教我！
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1楼 2010-07-25 21:44:38
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sunyongle1

木虫 (正式写手)
★
hnndpt(金币+1):谢谢参与
hnndpt(金币+1):非常感谢！！！ 2010-07-25 22:03:56
首先找到该基因在其他物种中的序列，然后找出保守结构域，再根据保守序列设计兼并引物，扩出你的目的基因的cDNA片段。然后再根据扩出的序列，做3‘和5’RACE。就ok了
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2楼2010-07-25 22:01:27
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sunyongle1

木虫 (正式写手)
还有你说找序列的问题，去ncbi就可以
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3楼2010-07-25 22:10:52
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yujiaping1

木虫 (著名写手)
★
hnndpt(金币+1):谢谢参与
在ncbi上nucleotide中，输入基因的名字、物种拉丁名，就可以找到这个基因的序列，如果找不到棉花的，就在近缘种中找找
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4楼2010-07-25 22:43:21
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tian1203

银虫 (著名写手)
★
hnndpt(金币+1):谢谢参与
去NCBI找棉花的近缘序列。根据相似性在NCBI找棉花的EST序列，再用DNASTAR软件拼接，然后用拼接好的序列设计引物...
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别紧张，我不是什么好人...
5楼2010-07-26 10:53:24
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周_yan

木虫 (小有名气)
★
hnndpt(金币+1):谢谢参与
利用同源克隆的方法进行克隆，先在NCBI上找到其他物种的相似的序列，翻译成蛋白序列，找到保守序列，设计兼并引物，再做5‘和3’RACE就行了，不过5‘不好做应注意。
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6楼2010-07-26 11:08:51
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xp198766

铁杆木虫 (著名写手)

小木虫职业打酱油滴~~！
★
hnndpt(金币+1):谢谢参与
给你网站，呵呵，里面有很多链接……
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/gene/
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7楼2010-07-26 11:11:47
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tongyanna

金虫 (正式写手)
去NCBI找
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自己的路，自己快乐的走
8楼2010-07-26 11:47:51
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