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hnndpt

铁虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】基因克隆问题求助!已有6人参与

做课题要克隆棉花的一个基因,但目前没有在文章中查到与此基因相关的序列,请问还有办法克隆吗?

此外,老师让从Datebase中查找与此相关的序列。,请问怎么查呢,谁会的话可以教教我!
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周_yan

木虫 (小有名气)


hnndpt(金币+1):谢谢参与
利用同源克隆的方法进行克隆,先在NCBI上找到其他物种的相似的序列,翻译成蛋白序列,找到保守序列,设计兼并引物,再做5‘和3’RACE就行了,不过5‘不好做应注意。
6楼2010-07-26 11:08:51
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sunyongle1

木虫 (正式写手)


hnndpt(金币+1):谢谢参与
hnndpt(金币+1):非常感谢!!! 2010-07-25 22:03:56
首先找到该基因在其他物种中的序列,然后找出保守结构域,再根据保守序列设计兼并引物,扩出你的目的基因的cDNA片段。然后再根据扩出的序列,做3‘和5’RACE。就ok了
2楼2010-07-25 22:01:27
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sunyongle1

木虫 (正式写手)

还有你说找序列的问题,去ncbi就可以
3楼2010-07-25 22:10:52
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yujiaping1

木虫 (著名写手)


hnndpt(金币+1):谢谢参与
在ncbi上nucleotide中,输入基因的名字、物种拉丁名,就可以找到这个基因的序列,如果找不到棉花的,就在近缘种中找找
4楼2010-07-25 22:43:21
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