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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 基因克隆问题
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11720497

新虫 (初入文坛)

[求助] 基因克隆问题

老师安排做一种植物A中的a基因的克隆，但是这个a基因在A中没有报道过任何信息，只能通过其他物种B、C中a基因序列保守序列设计兼并来P，但是老是P不出来。最近我用植物B中a基因的ORF设计引物来扩A的模板，结果P出来了条带，请问各位大侠，我接下来该怎么做？
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1楼 2012-11-27 10:43:46
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西农种子

木虫 (著名写手)

青虫还是酱爆的好
引用回帖:
9楼: Originally posted by 11720497 at 2012-11-27 13:51:48
我做的a基因在A中一点报道没，EST也没有，我现在是兼并扩不出来，所以才用的B植物中的a基因的ORF引物扩A模板，结果P出来比对100%。所以才感觉不靠谱。...

这样的啊~要不然的话就还是做RACE试试吧。我们实验室的那个做了RACE就弄好了。
植物A和B是不同科嘛？要是同科的话相似率还是蛮大的
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快来粉奶牛的围脖~~http://weibo.com/i/zhaoyuan913
10楼2012-11-27 14:12:24
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11720497

新虫 (初入文坛)
本人新申请的号，求各位大侠帮帮忙啊
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2楼2012-11-27 10:47:06
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西农种子

木虫 (著名写手)

青虫还是酱爆的好

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
连接到载体上测序。测序回来以后与类似物种进行序列比对。
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快来粉奶牛的围脖~~http://weibo.com/i/zhaoyuan913
3楼2012-11-27 10:50:46
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11720497

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 11720497 at 2012-11-27 10:47:06
本人新申请的号，求各位大侠帮帮忙啊

我那样做了，可是NCBI比对发现，和B中a基因相似度99%，怎么会这样啊
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4楼2012-11-27 10:53:03
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