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土壤真菌PCR的问题
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最近在P土壤真菌DNA，没条带，用的引物是ITS1F/ITS2 我是用周继中的方法提的DNA，测浓度（2g土差不多能提200~300 ng/ul）后稀释到 1 ng/ul 作为模板，同一份模板我在做细菌PCR时结果还行基本上都P的出来，但真菌是才开始摸索，望大家多提提建议 25ul 体系 模板 2 引物 1 水 9.5 ExTaq 12.5 PCR程序 94 ℃ for 4 min, 30 cycles of 30 s at 94 ℃, 50 ℃ for 1 min and 72 ℃ for 90 s, followed by 10 min at 72 ℃. |
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