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关于RNA电泳的一些疑惑
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作为分子生物学的初学者，我最近准备做RNA电泳，有一些疑惑，在这里向各位大人们请教，希望得到解答。： 1、RNA电泳是否可以直接使用琼脂糖胶？我看到很多人说应该使用变性胶。 2、RNA电泳的loading buffer与Marker是否是专有的？可不可以直接使用DNA电泳的呢？ 3、电泳之后很多人说会出现三条带。是三条带一起出现吗？有没有亮度的区别呢？ |
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zhangby2002
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4楼2012-08-10 21:13:49
2楼2012-08-10 09:16:32
tiani_tan
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【答案】应助回帖
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感谢参与，应助指数 +1
vivian26: 金币+1, ★★★很有帮助 2012-08-12 00:00:18
感谢参与，应助指数 +1
vivian26: 金币+1, ★★★很有帮助 2012-08-12 00:00:18
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主要看你的目的是什么。（以下内容仅限于普通的rt-pcr及qPCR） 1：电泳，用琼脂糖就行，1%即可，至于变性，如果质量要求高的话可以试试，但比较麻烦。 2：loadingbuffer可以用DNA电泳的，但若使用marker的话，有RNA电泳专用的，DNA marker毕竟和RNA结构不一样。也有说28S rRNA在2000bp的上方，不知道准不准。不用marker也行，毕竟你不需要知道大小，只要提出出总RNA，质量没问题就行。 3：理论上时三条带，28S是18S的2倍，质量好的话5S看不到，一般都会有点降解，所以都会看见5S。 PS：质量和浓度还可以通过紫外分光光度计测量A230，A260，A280看比值 |
3楼2012-08-10 20:47:36
5楼2012-08-11 10:11:39
