| 查看: 3125 | 回复: 12 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
[交流]
感受态细胞提取的质粒酶解后为什么带型不一样？ 已有7人参与
|
|||
|
有个问题始终想不明白 重组质粒带有氨苄抗性基因。重组质粒导入感受态细胞后铺带氨苄的平板，长出来的菌落应该都是成功摄入重组质粒的吧？挑出来若干个单菌落扩大培养后提取质粒，用限制酶进行酶切，为什么切出来的带有的还不一样呢？ 新手做分子，望高手解惑，谢谢。 [ Last edited by jackiey2 on 2012-7-30 at 09:16 ] |
回复此楼» 猜你喜欢
科研人必读：新一代 KRAS G12C 抑制剂 Olomorasib 的研究进展
已经有0人回复
-
BT-11（Omilancor）研究化合物全解析：从分子结构到实验应用要点
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有107人回复
-
富马酸贝达喹啉：二芳基喹啉类工具化合物的化学特征
已经有0人回复
-
BT投稿with editor状态快两周了，正常吗
已经有25人回复
-
Silevertinib（BDTX-1535）结构拆解：炔基双环片段为何成为合成瓶颈
已经有0人回复
-
RO4929097 解析：双苯并氮杂䓬骨架与 Notch 通路实验设计要点
已经有0人回复
-
分子量 1157 的 PROTAC 怎么配不析出：SGK3-PROTAC1 的溶解、分装与图谱复核
已经有0人回复
-
logP 6.1 的羧酸怎么配母液：GSK 650394 的溶解窗口与稀释顺序
已经有0人回复
-
从"水不溶"到 71 mg/mL：雷特格韦的 pH 依赖溶解与螯合色谱边界
已经有0人回复
-
133 Ų 的极性表面积，如何决定 TNG462 的母液配制与色谱条件
已经有0人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 求助，将质粒导入细胞再提出来，两个质粒跑胶的结果不一样？
已经有5人回复
- 转化时，长出白色单菌落，菌落ＰＣＲ后有条带，在培养，提质粒，没有条带，怎么回事
已经有4人回复
- 酵母重组质粒转化酵母后，长出的斑有大有小
已经有5人回复
- 质粒构建，挑单菌落验证总是假阳性，求分析原因？！
已经有29人回复
- 用的pCDNA-5重组质粒，通过测序检验质粒+目的基因是否构建成功
已经有5人回复
- 大质粒转化 感受态细胞问题
已经有23人回复
- 求助 提取质粒跑胶没带
已经有3人回复
- 转化之后复苏感受态细胞能用加了氨苄的LB培养基吗？
已经有11人回复
- 我买来的inv110画线挑菌后为什么做不了感受态
已经有4人回复
- 蓝白斑筛选白色菌落PCR无条带
已经有12人回复
- 求助——大家用的什么牌子的感受态细胞
已经有33人回复
- 提取重组质粒进行双酶切之后什么条带也没有，怎么回事？？
已经有7人回复
- 蓝白斑筛选没有菌落，或者都是白斑，是什么情况
已经有9人回复
- 农杆菌感受态细胞 是否有质粒
已经有3人回复
- 我提的质粒跑出来怎么这样的啊
已经有11人回复
- 质粒与片段的连接
已经有9人回复
- 关于质粒扩增和感受态转化
已经有5人回复
- 转化感受态后提取质粒，测浓度总是很低
已经有17人回复
- 高保真KOD和PCR的应用有哪些不同？
已经有10人回复
- 质粒快抽有条带，提取时却没有了，什么问题啊？
已经有15人回复
- 质粒在细胞内能存在多久
已经有9人回复
- 质粒提取 酶切 T载体与目的基因
已经有5人回复
- 质粒的若干问题！！！
已经有6人回复
- 感受态细胞里到底有没有质粒？
已经有7人回复
★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
小丹木木: 金币+3, 鼓励积极应助，解答问题 2012-08-01 14:06:22
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
小丹木木: 金币+3, 鼓励积极应助，解答问题 2012-08-01 14:06:22
|
分析 问题点一：你的重组的质粒在导入感受态细胞之前，你能确定你所用的质粒和目的片段都很好的连接了吗？ 问题点二：你的重组质粒在连接时，应该会有两种可能的。一是目的片段很好的连接到你所用的质粒上，得到你所要的重组质粒：二是你所用的质粒在你切完后，再用连接酶连接，质粒又发生自连。这两种质粒同时被导入感受态细胞后，你再进行验证时，会显示这两种质粒的片段大小。（而且，你的目的片段我不太了解。有时也可能发生目的片段被切后，再用连接酶进行连接时，也会发生自连。这样的话，最后的结果就有可能出现三种片段大小。） |
8楼2012-08-01 11:55:54
dshlove
木虫 (正式写手)
- MolEPI: 17
- 应助: 237 (大学生)
- 金币: 4764.7
- 散金: 20
- 红花: 10
- 帖子: 852
- 在线: 419.2小时
- 虫号: 1609389
- 注册: 2012-02-10
- 性别: GG
- 专业: 污染控制化学
2楼2012-07-30 09:30:07
3楼2012-07-30 15:52:42
dshlove
木虫 (正式写手)
- MolEPI: 17
- 应助: 237 (大学生)
- 金币: 4764.7
- 散金: 20
- 红花: 10
- 帖子: 852
- 在线: 419.2小时
- 虫号: 1609389
- 注册: 2012-02-10
- 性别: GG
- 专业: 污染控制化学
4楼2012-07-30 16:12:45
