| 查看: 10080 | 回复: 11 | |||
柠檬可乐星新虫 (小有名气)
|
[求助]
转化之后复苏感受态细胞能用加了氨苄的LB培养基吗？ 已有3人参与
|
||
|
我看师姐做的是把连接产物转化到感受态细胞之后，加入800ul 不加氨苄的LB培养基，然后37℃摇菌1h。 我想问的是这一步为什么不能用加了氨苄的LB培养基呢？这样不是还可以防止杂菌的生长吗？ 第一次做克隆，有些步骤的原理还不是很清楚。求高手指点！ |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 小知识 |
» 猜你喜欢
留学--博士招生
已经有16人回复
-
化学工程，本211，求调剂，ab区不限
已经有4人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有223人回复
-
湖北师范大学招调剂啦
已经有7人回复
-
邵阳学院食品与化学工程学院硕士调剂
已经有0人回复
-
天津商业大学 生物与医药课题组招生
已经有0人回复
-
生物化工学硕招收调剂
已经有0人回复
-
广东石油化工学院2026年硕士研究生需要多名生物，制药工程，食品专业的调剂生
已经有0人回复
-
317分 一志愿江南大学 化学工程学硕 求调剂
已经有6人回复
-
化工申博
已经有3人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- T载体克隆做不出来，求帮助
已经有24人回复
- 连接转化后长出抗性菌落后的LB培养基能保存多长时间
已经有5人回复
- 感受态细胞污染的问题
已经有10人回复
- 急求！GFP载体转化野生型枯草芽孢杆菌以及红霉素浓度
已经有15人回复
- 转化大肠杆菌平板出现卫星菌落是怎么回事？
已经有12人回复
- 感受态细胞提取的质粒酶解后为什么带型不一样？
已经有12人回复
- 感受态细胞转化，50ul感受态细胞+50ulDNA，能成功吗？
已经有20人回复
- 求助 PMD 18T载体克隆转化详细不住
已经有9人回复
- 为什么最近做连接转化总是失败
已经有20人回复
- 如何把质粒转入大肠杆菌中？
已经有13人回复
- 求助关于转化的问题？
已经有22人回复
- 乳酸菌感受态细胞的制备
已经有6人回复
- 【专题】分子克隆实验专题--（五）感受态细胞的选择与使用
已经有15人回复
- 【分享】LB平板；SOB；SOC培养基的制备方法
已经有10人回复
- 【求助/交流】pMD-18T载体连接出现了问题，请各位高手指点！！！
已经有17人回复
- 【求助/交流】三抗板上的菌落挑至液体培养基中摇菌不长
已经有3人回复
- 【求助/交流】大肠杆菌DH5α感受态细胞制备求助
已经有19人回复
- 【求助/交流】大肠杆菌感受态污染问题
已经有21人回复
- 【求助/交流】请教关于大肠杆菌lamda RED重组问题
已经有23人回复
lihe131
至尊木虫 (文坛精英)
- 应助: 106 (高中生)
- 金币: 12400.9
- 散金: 3690
- 红花: 10
- 帖子: 14218
- 在线: 263.6小时
- 虫号: 504554
- 注册: 2008-02-16
- 性别: GG
- 专业: 生物物理、生物化学与分子
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+1, 鼓励交流！ 2013-12-13 14:44:05
柠檬可乐星: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-12-13 15:12:24
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+1, 鼓励交流！ 2013-12-13 14:44:05
柠檬可乐星: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-12-13 15:12:24
|
是不应该加的。 热激就是让菌体瞬间热胀，表面蛋白掉下来形成通道，质粒才能进去，这个过程对细菌是有伤害的。菌体42度热激之后很脆弱。另外热激时会死一部分细菌，死掉的细菌会裂解，释放出一些蛋白酶什么的，对活着的细菌也不太好。用不加抗生素的LB37度温浴是为了让还活着的细菌更好的复苏。如果加了抗生素会增加细菌复苏时的负担。但是温浴的时间也不宜过长，一般以半个小时到一个小时之间为宜。 |
4楼2013-12-13 11:44:45
gyesang
荣誉版主 (著名写手)
-
专家经验: +24 - MolEPI: 31
- 应助: 599 (博士)
- 贵宾: 2.689
- 金币: 24334.9
- 散金: 1088
- 红花: 88
- 沙发: 2
- 帖子: 2327
- 在线: 623.1小时
- 虫号: 849017
- 注册: 2009-09-16
- 性别: GG
- 专业: 细胞信号转导
- 管辖: 分子生物
6楼2013-12-13 14:43:45
2楼2013-12-13 11:03:59
柠檬可乐星
新虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 2268.5
- 散金: 175
- 红花: 2
- 帖子: 250
- 在线: 48.1小时
- 虫号: 2414119
- 注册: 2013-04-12
- 专业: 生物大分子结构与功能
3楼2013-12-13 11:12:45
5楼2013-12-13 13:58:09
7楼2013-12-13 15:32:43
8楼2013-12-13 22:45:53
b6122
木虫 (正式写手)
- 应助: 37 (小学生)
- 金币: 2987.9
- 散金: 1000
- 红花: 5
- 帖子: 636
- 在线: 46.9小时
- 虫号: 172913
- 注册: 2006-01-20
- 专业: 生物医用高分子材料
9楼2013-12-14 01:07:55
10楼2013-12-15 12:20:31
