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柠檬可乐星

新虫 (小有名气)

[求助] 转化之后复苏感受态细胞能用加了氨苄的LB培养基吗? 已有3人参与

我看师姐做的是把连接产物转化到感受态细胞之后,加入800ul 不加氨苄的LB培养基,然后37℃摇菌1h。
我想问的是这一步为什么不能用加了氨苄的LB培养基呢?这样不是还可以防止杂菌的生长吗?
第一次做克隆,有些步骤的原理还不是很清楚。求高手指点!
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b6122

木虫 (正式写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by gyesang at 2013-12-13 01:43:45
根本原因是,你质粒刚转化进大肠杆菌细胞里面,那些抗性基因诸如卡那,氨苄还没有开始表达呢或者开始表达,但表达很弱,你加带抗性的LB复苏会极大的降低转化效率

这个才是答案
9楼2013-12-14 01:07:55
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