| 查看: 4444 | 回复: 28 | ||||
[交流]
就要被蛋白质电泳（SDS-PAGE）灭了，有图有真相，望高手指点 已有21人参与
|
|
我的分离胶浓度为12，实验室其他人和我同时跑都能跑出清晰的条带。 marker和样品的量均为10微升。 左边两个是我的样，右边依次是marker、同学的样。我几经跑很多次了，每次都这样，这不是偶然，而是必然啊 我用细菌胞外产物跑PAGE，要不是没有条带，要不就是模糊的条带，maker和样品的泳道挨着就会被及变形，样品的泳道很宽，差不多是两个用到那么宽。用考马斯亮蓝测定蛋白质含量为1.78mg/ml。在电泳时会看到有黄色物质从样品泳道中析出。请各位高手指点迷津，小女子不胜感激啊！！！！   |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 科研辅助 |
» 猜你喜欢
材料与化工304求B区调剂
已经有7人回复
-
0703化学336分求调剂
已经有4人回复
-
[复试调剂]西南科技大学国防/材料导师推荐
已经有6人回复
-
化学工程321分求调剂
已经有12人回复
-
211本，11408一志愿中科院277分，曾在中科院自动化所实习
已经有4人回复
-
材料专硕326求调剂
已经有5人回复
-
东南大学364求调剂
已经有5人回复
-
国自科面上基金字体
已经有7人回复
-
药学383 求调剂
已经有4人回复
-
286求调剂
已经有5人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 请问哪位高手用琼脂糖电泳跑过蛋白？
已经有10人回复
- 了解蛋白质性质及其熟悉电泳的高手请进！
已经有11人回复
- Bio-rad蛋白电泳的问题请教，有图，希望有经验者多多指教！
已经有27人回复
- 昆虫RNA 提取！电泳图，看不懂！请高手指点！
已经有9人回复
- 蛋白质电泳拖尾
已经有7人回复
- 请帮忙推荐下蛋白电泳装置， 或洒点蛋白纯化 or PAGE 经验啊！
已经有8人回复
- 求高手指点RNA电泳图~~~~
已经有25人回复
- 双向电泳 蛋白纯化
已经有6人回复
- 我现在想做蛋白质电泳，不知从何下手
已经有12人回复
- 请教高手 电泳为什么是蛋白质小分子跑在最下面
已经有10人回复
- 【求助】WB过程中跑电泳时，蛋白质外漏
已经有5人回复
- 【求助/交流】噬菌体DNA提取，电泳结果显示不止一条带，等待高手指点
已经有7人回复
- 【求助】大米 蛋白质电泳怎么做？主要是蛋白的提取？
已经有5人回复
chengjg
木虫 (正式写手)
- 应助: 40 (小学生)
- 金币: 4309.6
- 散金: 7
- 红花: 31
- 帖子: 659
- 在线: 188.9小时
- 虫号: 1017936
- 注册: 2010-05-13
- 性别: GG
- 专业: 生物大分子结构与功能
2楼2012-05-17 19:44:30
3楼2012-05-17 19:53:51
colorfulmiao
木虫 (小有名气)
- 应助: 16 (小学生)
- 金币: 1965.3
- 散金: 100
- 红花: 9
- 帖子: 153
- 在线: 72.3小时
- 虫号: 1548678
- 注册: 2011-12-23
- 专业: 食品科学基础
4楼2012-05-17 20:15:57
5楼2012-05-17 21:37:06
★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
zhaohq1209: 金币+4, 鼓励交流哈~高手初现 2012-05-18 08:42:44
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
zhaohq1209: 金币+4, 鼓励交流哈~高手初现 2012-05-18 08:42:44
|
黄色物质有可能是PH值不对啊，一般情况下用TCA即三氯乙酸浓缩后的蛋白，如果不用丙酮洗涤除去TCA残留，在加2倍或5倍SDS上样缓冲液前，不加一定量的NaOH中和TCA的话，用SDS样品处理液处理后的蛋白样品在上样前是黄色的。还有如果自己配置的SDS上样缓冲液，如果PH值偏低也是显示有点黄色。但是以我们的经验来看，样品PH值稍微偏低基本不影响跑样。另外TCA法浓缩蛋白跑PAGE还是很漂亮的。 还有，我们实验室曾经有表达的很多上清蛋白在经PBS透析后经PEG8000浓缩，测定蛋白样品也挺大，但是跑蛋白胶就是像楼主似的模糊一片。怀疑是PEG8000的问题影响跑样。后改为TCA浓缩后大部分解决了这一问题。但是有的蛋白用硫酸铵浓缩后跑样还是有时候呈现模糊一片。仅限于个别蛋白，猜测可能与蛋白表达量低等有关。 |
6楼2012-05-17 22:41:25
stone856
银虫 (小有名气)
- 应助: 10 (幼儿园)
- 金币: 257.4
- 散金: 200
- 帖子: 261
- 在线: 191.2小时
- 虫号: 495244
- 注册: 2008-01-14
- 性别: GG
- 专业: 农业昆虫学
7楼2012-05-18 06:11:33
8楼2012-05-18 09:12:32
ybj1983
至尊木虫 (著名写手)
- 应助: 3 (幼儿园)
- 金币: 14651.9
- 散金: 100
- 帖子: 1612
- 在线: 234.1小时
- 虫号: 987078
- 注册: 2010-04-01
- 性别: GG
- 专业: 基因表达调控与表观遗传学
9楼2012-05-18 09:30:43
colorfulmiao
木虫 (小有名气)
- 应助: 16 (小学生)
- 金币: 1965.3
- 散金: 100
- 红花: 9
- 帖子: 153
- 在线: 72.3小时
- 虫号: 1548678
- 注册: 2011-12-23
- 专业: 食品科学基础
10楼2012-05-18 10:02:34
20