24小时热门版块排行榜

返回列表

当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

1397717

新虫 (初入文坛)

应助: 1 (幼儿园)
金币: 180.5
帖子: 16
在线: 8.7小时
虫号: 1547357
注册: 2011-12-22
性别: GG
专业: 临床分子生物学检验

[求助] PCR程序设置

现在在做一个PCR扩增实验，引物和DNA都有，请问如何设置PCR程序？
Tm值在引物设计的时候已经确定了，扩增片段大小分别为431bp和671bp，那延伸时间和循环次数如何确定？谢谢！

[ Last edited by 1397717 on 2012-3-5 at 14:26 ]

回复此楼

» 猜你喜欢

为什么蛋白质氨基酸测定大家都测17种? 已经有5人回复
《灰分记：我与坩埚的“灰烬”之恋》已经有3人回复
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费? 已经有98人回复
求助食品检验工（基础知识），中国劳动社会出版社电子版已经有5人回复
胶体几丁质的结晶度？已经有0人回复
诚挚招收全日制博士！！！中国农业科学院麻类研究所谭志坚研究员课题组招收博士已经有2人回复
三甲基羟乙基丙二胺的合成路线已经有5人回复

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

实验流程及配置的问题已经有6人回复
Touch Down PCR 已经有17人回复
压电陶瓷极化条件如何设置已经有3人回复
已经得到目的基因的全长，现在要PCR将目的基因全长P出来，如何设计引物？谢谢已经有12人回复
高度同源的基因做qPCR如何区分？已经有11人回复
PCR引物GC含量过低时候，如何调整PCR体系？已经有6人回复
RT-PCR实验操作过程中遇到的问题已经有15人回复
求关于Overlap PCR(重叠延伸PCR)的具体实验过程及原理已经有10人回复
PCR条带极弱，二聚体很亮，应如何调整？已经有9人回复
ＰＣＲ仪做连接已经有9人回复
如何确定pcr产物是目的片段已经有19人回复
求助：约6kb质粒做模板的pcr程序怎么设定啊已经有12人回复
PCR条件如何设置？已经有4人回复
求助PCR反应参数设置已经有9人回复
自设简并引物几对，请高手帮检查下~~~ 已经有18人回复
如何设计重叠延伸PCR引物已经有14人回复
PCR程序设计的问题已经有23人回复
【求助/交流】引物设计信息如此，touchdownPCR如何设计？已经有7人回复
【求助/交流】从RNA到cDNA合成再到克隆PCR的实验技巧和操作细节问题若干，寻求解答已经有12人回复

1楼2012-03-05 14:22:53

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

纸船

铜虫 (小有名气)

应助: 6 (幼儿园)
金币: 563
红花: 1
帖子: 57
在线: 47.9小时
虫号: 962675
注册: 2010-03-06
专业: 农业昆虫学

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
1397717(金币+5): ★★★很有帮助 2012-03-06 09:58:02
1397717(金币+5): ★★★很有帮助 2012-03-06 09:58:19
1397717(金币+5): ★★★很有帮助 2012-03-06 09:59:24

退火温度跟理论Tm值是有差别的，建议做下梯度PCR，你这么长的片段，延伸30S足够了，循环次数建议30-35.

赞一下

回复此楼

4楼2012-03-05 15:11:46

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

相关版块跳转我要订阅楼主 1397717 的主题更新

返回列表