应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » WB电泳时，蛋白样品堵在上样口
151/2返回列表12下一页
查看: 3394  |  回复: 14
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

cangyiliuyun

新虫 (初入文坛)

[求助] WB电泳时，蛋白样品堵在上样口 已有1人参与

提取的是细胞蛋白，贴壁细胞，10^7个细胞，用200微升RIPA（强）裂解液，冰上裂解30-45min，离心取上清，加buffer 100度煮10分钟，上样电泳，然后就遇到问题了，样品有一部分堵在上样孔，一部分先跑下去，然后形成拖尾，一直在想办法都没解决，有没有哪位也遇到过，或者帮帮忙看看是哪出了问题？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2012-02-04 17:34:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

blackrose8089

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西瓜(金币+1, 专家考核): 有可能 2012-02-04 21:12:43
煮完楼主没离心？很有可能是没溶解好
赞一下(1人) 回复此楼
jiayoubashaonian
2楼2012-02-04 20:41:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cangyiliuyun

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
楼: Originally posted by blackrose8089 at 2012-02-04 20:41:20:
煮完楼主没离心？很有可能是没溶解好

离心了
回复此楼
3楼2012-02-04 23:51:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lzgxgz

至尊木虫 (正式写手)
稀释
回复此楼
4楼2012-02-05 07:58:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

0624410024

金虫 (正式写手)

Begging for knowledge

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西瓜(金币+1): 鼓励应助 2012-02-05 12:20:52
个人觉得是你的裂解液制备有问题！你再看看吧！
赞一下(1人) 回复此楼
每天坚持多一点，以后困难少一点！
5楼2012-02-05 08:56:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

blackrose8089

铁杆木虫 (职业作家)
引用回帖:
3楼: Originally posted by cangyiliuyun at 2012-02-04 23:51:17:
离心了

是不是样品的溶解没完全？
赞一下 回复此楼
jiayoubashaonian
6楼2012-02-05 10:00:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cangyiliuyun

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
楼: Originally posted by blackrose8089 at 2012-02-04 20:41:20:
煮完楼主没离心？很有可能是没溶解好

要是没溶解好怎么把，换buffer还是裂解液？buffer我新配一些还是这个问题，是不是buffer盐离子浓度低了，会这样？
赞一下 回复此楼
7楼2012-02-05 11:49:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

blackrose8089

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
西瓜(金币+4): 专业！ 2012-02-05 12:20:36
引用回帖:
7楼: Originally posted by cangyiliuyun at 2012-02-05 11:49:24:
要是没溶解好怎么把，换buffer还是裂解液？buffer我新配一些还是这个问题，是不是buffer盐离子浓度低了，会这样？

楼主能不能将裂解的样品量适当减少一些，延长裂解时间，还有上样量是否可以减少一些？我们之前也碰到这样的问题，后来花了一个多月的时间，根据已经发表的文章，来优化样品提取，裂解，上样，现在的体系已经很稳定了，每次的重复挺好的。
赞一下(1人) 回复此楼
jiayoubashaonian
8楼2012-02-05 12:08:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

c3024034

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
估计是你缓冲液或胶配制的问题
赞一下 回复此楼
9楼2012-02-06 18:36:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

freshblack

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
样品浓度降低，煮的时间可以适当延长呀~
赞一下 回复此楼
勤有功，戏无益，满招损，谦得益
10楼2012-02-07 14:21:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 cangyiliuyun 的主题更新
151/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 290分材料工程085601求调剂 数二英一 +8 llx0610 2026-03-02 9/450 2026-03-02 22:09 by 无际的草原
[考研] 085602化学工程350，调剂，有没有211的 +4 利好利好. 2026-03-02 7/350 2026-03-02 21:46 by sunny81
[考研] 0856材料与化工，270求调剂 +11 YXCT 2026-03-01 13/650 2026-03-02 21:38 by sunny81
[考研] 321求调剂一志愿东北林业大学材料与化工英二数二 +5 虫虫虫虫虫7 2026-03-01 9/450 2026-03-02 21:33 by sunny81
[考研] 276求调剂 +5 路lyh123 2026-02-28 6/300 2026-03-02 20:35 by hypershenger
[考研] 材料学硕318求调剂 +10 February_Feb 2026-03-01 10/500 2026-03-02 20:18 by hypershenger
[考研] 化工270求调剂 +9 什么名字qwq 2026-03-02 9/450 2026-03-02 19:31 by caszguilin
[考研] 283求调剂 +5 鹿沫笙 2026-03-02 5/250 2026-03-02 19:19 by zhukairuo
[考研] 一志愿东北大学化学314分求调剂 +3 lr1212.. 2026-03-02 3/150 2026-03-02 17:36 by yeahyou
[考研] 一志愿华中科技大学，化学专业344分，求调剂 +3 邢xing1 2026-03-02 3/150 2026-03-02 17:32 by houyaoxu
[考研] 303求调剂 +5 今夏不夏 2026-03-01 5/250 2026-03-02 15:01 by 向上的胖东
[考研] 江苏省农科院招调剂1名 +4 Qwertyuop 2026-03-01 4/200 2026-03-02 14:27 by 升格阿达
[考研] 265分求调剂不调专业和学校有行学上就 +6 礼堂丁真258 2026-02-28 9/450 2026-03-02 12:04 by 52hz~~
[考研] 295求调剂 +8 19171856320 2026-02-28 8/400 2026-03-02 11:19 by yuchj
[考研] 274求调剂 +3 cgyzqwn 2026-03-01 7/350 2026-03-02 10:38 by lature00
[考研] 材料类求调剂 +11 wana_kiko 2026-02-28 14/700 2026-03-02 08:46 by 聪明的大松鼠
[考研] 279求调剂 +3 dua1 2026-03-01 4/200 2026-03-02 00:23 by 大脸蛋子
[考研] 一志愿中南大学理学化学 +4 15779376950 2026-03-01 5/250 2026-03-01 19:00 by Fff-1
[考研] 328求调剂 +3 aaadim 2026-03-01 5/250 2026-03-01 17:29 by njzyff
[论文投稿] Optics letters投稿被拒求助 30+3 luckyry 2026-02-26 4/200 2026-03-01 09:06 by babero
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭