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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » WB电泳时，蛋白样品堵在上样口
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cangyiliuyun

新虫 (初入文坛)

[求助] WB电泳时，蛋白样品堵在上样口 已有1人参与

提取的是细胞蛋白，贴壁细胞，10^7个细胞，用200微升RIPA（强）裂解液，冰上裂解30-45min，离心取上清，加buffer 100度煮10分钟，上样电泳，然后就遇到问题了，样品有一部分堵在上样孔，一部分先跑下去，然后形成拖尾，一直在想办法都没解决，有没有哪位也遇到过，或者帮帮忙看看是哪出了问题？
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1楼 2012-02-04 17:34:25
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cangyiliuyun

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
楼: Originally posted by blackrose8089 at 2012-02-04 20:41:20:
煮完楼主没离心？很有可能是没溶解好

离心了
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3楼2012-02-04 23:51:17
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blackrose8089

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西瓜(金币+1, 专家考核): 有可能 2012-02-04 21:12:43
煮完楼主没离心？很有可能是没溶解好
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jiayoubashaonian
2楼2012-02-04 20:41:20
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0624410024

金虫 (正式写手)

Begging for knowledge

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西瓜(金币+1): 鼓励应助 2012-02-05 12:20:52
个人觉得是你的裂解液制备有问题！你再看看吧！
赞一下(1人) 回复此楼
每天坚持多一点，以后困难少一点！
5楼2012-02-05 08:56:27
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blackrose8089

铁杆木虫 (职业作家)
引用回帖:
3楼: Originally posted by cangyiliuyun at 2012-02-04 23:51:17:
离心了

是不是样品的溶解没完全？
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jiayoubashaonian
6楼2012-02-05 10:00:02
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