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littlefinger

新虫 (初入文坛)

[求助] SDS-PAGE 显示的蛋白分子量比实际大

请问大家一下呀!为什么每次做蛋白的SDS-PAGE的时候,显示出来的蛋白分子量都比实际的分子量大呢?我们的蛋白是19kDa,显示的总是20多,其他的也是这样的!
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yangbin1

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


amisking(金币+1): 鼓励发帖交流。 2011-12-07 19:20:50
蛋白标签也占大小。比如说his标签或gst标签,你是否计算在内了。
3楼2011-12-07 14:38:31
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c3024034

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
amisking(金币+3): 鼓励积极应助! 2011-12-07 19:20:45
这个问题原因比较多,如果是单纯的是MARKER 的问题 你可以换其他公司的看看, 另一种原因是可能你的蛋白被修饰了,导致迁移速度变慢,我的一点小看法
2楼2011-12-07 11:51:44
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chenchuan24891

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
amisking(金币+3): 鼓励积极应助! 2011-12-07 19:20:57
这个问题也确实比较复杂,因为有可能有很多原因导致的,有可能会是MARKER的原因,也有可能就是1楼所说的,发生了你想不到的修饰反应,上次我的一个蛋白就好几处有修饰反应存在,因为我电脉后再做了个肽图指纹图谱。我建议你先换个MARKER看一下,如果不行再进一步找原因。
4楼2011-12-07 16:29:03
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梓魅

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

我也遇到了这个问题……你的蛋白是用什么溶解的呢?我的是用8M尿素溶解的,然后就偏大啦……
5楼2011-12-08 11:43:50
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