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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » SDS-PAGE 显示的蛋白分子量比实际大
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littlefinger

新虫 (初入文坛)

[求助] SDS-PAGE 显示的蛋白分子量比实际大

请问大家一下呀！为什么每次做蛋白的SDS-PAGE的时候，显示出来的蛋白分子量都比实际的分子量大呢？我们的蛋白是19kDa，显示的总是20多，其他的也是这样的！
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1楼 2011-12-07 11:43:16
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c3024034

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
amisking(金币+3): 鼓励积极应助！ 2011-12-07 19:20:45
这个问题原因比较多，如果是单纯的是MARKER 的问题 你可以换其他公司的看看， 另一种原因是可能你的蛋白被修饰了，导致迁移速度变慢，我的一点小看法
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2楼2011-12-07 11:51:44
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yangbin1

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
amisking(金币+1): 鼓励发帖交流。 2011-12-07 19:20:50
蛋白标签也占大小。比如说his标签或gst标签，你是否计算在内了。
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3楼2011-12-07 14:38:31
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chenchuan24891

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
amisking(金币+3): 鼓励积极应助！ 2011-12-07 19:20:57
这个问题也确实比较复杂，因为有可能有很多原因导致的，有可能会是MARKER的原因，也有可能就是1楼所说的，发生了你想不到的修饰反应，上次我的一个蛋白就好几处有修饰反应存在，因为我电脉后再做了个肽图指纹图谱。我建议你先换个MARKER看一下，如果不行再进一步找原因。
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4楼2011-12-07 16:29:03
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梓魅

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

我也遇到了这个问题……你的蛋白是用什么溶解的呢？我的是用8M尿素溶解的，然后就偏大啦……
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5楼2011-12-08 11:43:50
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btx362237729

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

很有可能是marker的问题。。。预染的marker一般不准
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人生最黑暗的时光终于过去了
6楼2011-12-08 22:18:42
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