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zhangyt7638

木虫 (著名写手)

[求助] 蛋白酶菌株酶活问题

产蛋白酶菌株在酪蛋白琼脂上透明圈与菌落直径之比挺大,转接奶粉培养基摇瓶培养酶活却很小,是不是因为培养基成分变了引起的还是要考虑接种量、温度、pH、培养时间、转速等因素,底物诱导或产物阻遏的问题,请高手指点!
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征南将军

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
zhang8826857(金币+5): 鼓励新虫 2011-11-22 15:51:52
透明圈大只能作为筛选的一个参考,不能说透明圈大,酶活就大的,还是要测定到的酶活为准
2楼2011-11-21 16:45:14
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yupeibin

禁虫 (正式写手)


amisking(金币+1): 鼓励发帖交流。 2011-11-21 18:38:06
本帖内容被屏蔽

3楼2011-11-21 18:20:42
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京京李

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


zhang8826857(金币+1): 鼓励交流 2011-11-22 15:52:11
zhangyt7638(金币+3): 2011-11-25 09:48:10
是不是楼主在筛选高产菌株。如果是这样的话,表型延迟可能需要考虑一下!
4楼2011-11-22 12:12:14
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10809036

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


zhang8826857(金币+1): 鼓励交流 2011-11-22 15:52:22
你可以用酶标仪具体测一下。透明圈不是很准。要不你可以多测几下。。看看
想要走得快,就单独上路;想要走得远,就结伴同行!!
5楼2011-11-22 14:20:28
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stone_f

铜虫 (初入文坛)

楼主你在摇瓶培养的时候氮源是不是只用了奶粉,建议你考虑下培养基中加一部分蛋白胨或者无机氮源,以供菌体前期生长用
6楼2011-11-22 18:53:47
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biolio2009

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

zhangyt7638(金币+2): 非常感谢 2011-11-25 09:47:16
楼主  这个必须测定蛋白酶活力,这个很简单啊  就有国标可用,
而且 培养基用奶粉 代价也太大了吧,玉米粉我们用的 就非常好啊
而且成本也很低的,换一下 试试
7楼2011-11-23 09:03:31
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xzhiqiang

禁虫 (正式写手)

本帖内容被屏蔽

8楼2011-11-23 15:30:28
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icz

金虫 (小有名气)


zhang8826857(金币+1): 鼓励交流 2011-11-30 12:42:05
酪蛋白平板筛选法只是反应蛋白酶活力的一个初筛标准,需要进一步确定其蛋白酶活力是否真高;
如果确实高,需要优化你的液态培养条件,包括培养基、培养工艺等;
另外,强调一点,固态培养产酶和液态培养产酶条件差别很大,也与菌株特性相关,常常需要专用菌株。
今生的追求大于我的生命!
9楼2011-11-30 11:26:34
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thinkreed

铁虫 (小有名气)

我也在在做蛋白酶菌种的筛选,发现酶活跟透明圈有一定关系但不是绝对的,有些菌株有透明圈却没有酶活
10楼2014-05-27 16:30:38
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