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snoopyzxx

木虫 (著名写手)

[交流] 【求助/交流】蛋白酶抑制剂PMSF的使用问题

我做蛋白纯化,要用到PMSF等蛋白酶抑制剂,
据说PMSF是不可逆抑制剂,而且半衰期比较短,那么在一个纯化过程中,需要补加PMSF吗?
抑或是因为其是不可逆抑制剂,只需要加一次就够了?

另外,大家有没有其他便宜、好用、无毒的抑制剂推荐一下啊?我主要做大肠杆菌,能有效抑制大肠杆菌的本底蛋白酶就够了。
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snoopyzxx

木虫 (著名写手)

引用回帖:
7楼: Originally posted by wangzi4ever at 2011-10-17 10:44:35:
各位问下,pmsf工作液如何配制,浓度,及如何保存?请高手解答下,万分感谢。

工作浓度:17~174ug/ml(0.1~1mM),储存液浓度为100或200mM;
用乙醇或异丙醇配制。
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8楼2011-10-17 14:19:13
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liuyuan614

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我来学习pmsf配置方法的 谢7楼的
10楼2013-10-22 12:56:40
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普通回帖

kekely555

新虫 (小有名气)

★ ★
snoopyzxx(金币+1):谢谢 2010-09-04 19:45:09
scelab(金币+2):鼓励新虫!欢迎多来交流!:tiger06: 2010-09-04 23:09:02
有毒性性小的好像是ABEF的,但是贵点。
Fighnting
2楼2010-09-04 19:06:08
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snoopyzxx

木虫 (著名写手)

AEBSF.HCl
  分子量:239.7
  分子式:C8H10NSO2F.HCl
  用途:不逆地抑制丝氨酸类蛋白酶,比如:胰蛋白酶,胰凝乳蛋白酶,血管舒缓素,血纤维蛋白溶酶,凝血酶。可作为PMSF的替代品,无毒。


用这个还是不现实的。
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3楼2010-09-04 19:45:33
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kekely555

新虫 (小有名气)

cock tail 就 更贵了吧
Fighnting
4楼2010-09-04 22:11:34
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xppcomeon

捐助贵宾 (正式写手)

snoopyzxx(金币+1):谢谢 2010-09-05 08:19:09
PMSF我都是现配现用,纯化过程中溶液都要加抑制剂
5楼2010-09-04 23:29:35
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贺兰10

银虫 (小有名气)

snoopyzxx(金币+1): 2010-09-06 13:31:29
有很多啊,德国MERCK就有好多种类。
具体可以到merck的官方网搜搜,不过进口试剂就是贵。
如果是北方的同学,可以搜一下北京希凯,他们有卖。

[ Last edited by 贺兰10 on 2010-9-5 at 15:07 ]
6楼2010-09-05 14:43:38
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wangzi4ever

金虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
各位问下,pmsf工作液如何配制,浓度,及如何保存?请高手解答下,万分感谢。
7楼2011-10-17 10:44:35
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wangzi4ever

金虫 (正式写手)

引用回帖:
8楼: Originally posted by snoopyzxx at 2011-10-17 14:19:13:
工作浓度:17~174ug/ml(0.1~1mM),储存液浓度为100或200mM;
用乙醇或异丙醇配制。

thank u
9楼2011-10-17 19:07:51
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