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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 【求助/交流】蛋白酶抑制剂PMSF的使用问题
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snoopyzxx

木虫 (著名写手)

[交流] 【求助/交流】蛋白酶抑制剂PMSF的使用问题

我做蛋白纯化，要用到PMSF等蛋白酶抑制剂，
据说PMSF是不可逆抑制剂，而且半衰期比较短，那么在一个纯化过程中，需要补加PMSF吗？
抑或是因为其是不可逆抑制剂，只需要加一次就够了？

另外，大家有没有其他便宜、好用、无毒的抑制剂推荐一下啊？我主要做大肠杆菌，能有效抑制大肠杆菌的本底蛋白酶就够了。
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VX：19192310212；公众号：生物技术与IVD
1楼 2010-09-04 14:56:20
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snoopyzxx

木虫 (著名写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by wangzi4ever at 2011-10-17 10:44:35:
各位问下，pmsf工作液如何配制，浓度，及如何保存？请高手解答下，万分感谢。

工作浓度：17~174ug/ml（0.1~1mM），储存液浓度为100或200mM；
用乙醇或异丙醇配制。
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VX：19192310212；公众号：生物技术与IVD
8楼2011-10-17 14:19:13
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kekely555

新虫 (小有名气)
★ ★
snoopyzxx(金币+1):谢谢 2010-09-04 19:45:09
scelab(金币+2):鼓励新虫！欢迎多来交流！:tiger06: 2010-09-04 23:09:02
有毒性性小的好像是ABEF的，但是贵点。
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Fighnting
2楼2010-09-04 19:06:08
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snoopyzxx

木虫 (著名写手)
AEBSF.HCl
  分子量：239.7
  分子式：C8H10NSO2F.HCl
  用途：不逆地抑制丝氨酸类蛋白酶，比如：胰蛋白酶，胰凝乳蛋白酶，血管舒缓素，血纤维蛋白溶酶，凝血酶。可作为PMSF的替代品，无毒。


用这个还是不现实的。
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VX：19192310212；公众号：生物技术与IVD
3楼2010-09-04 19:45:33
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kekely555

新虫 (小有名气)
cock tail 就 更贵了吧
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Fighnting
4楼2010-09-04 22:11:34
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