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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 蛋白酶菌株酶活问题
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zhangyt7638

木虫 (著名写手)

[求助] 蛋白酶菌株酶活问题

产蛋白酶菌株在酪蛋白琼脂上透明圈与菌落直径之比挺大，转接奶粉培养基摇瓶培养酶活却很小，是不是因为培养基成分变了引起的还是要考虑接种量、温度、pH、培养时间、转速等因素，底物诱导或产物阻遏的问题，请高手指点!
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1楼 2011-11-21 12:40:56
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征南将军

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
zhang8826857(金币+5): 鼓励新虫 2011-11-22 15:51:52
透明圈大只能作为筛选的一个参考，不能说透明圈大，酶活就大的，还是要测定到的酶活为准
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2楼2011-11-21 16:45:14
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yupeibin

禁虫 (正式写手)
★
amisking(金币+1): 鼓励发帖交流。 2011-11-21 18:38:06
本帖内容被屏蔽
3楼2011-11-21 18:20:42
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京京李

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
zhang8826857(金币+1): 鼓励交流 2011-11-22 15:52:11
zhangyt7638(金币+3): 2011-11-25 09:48:10
是不是楼主在筛选高产菌株。如果是这样的话，表型延迟可能需要考虑一下！
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4楼2011-11-22 12:12:14
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10809036

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
zhang8826857(金币+1): 鼓励交流 2011-11-22 15:52:22
你可以用酶标仪具体测一下。透明圈不是很准。要不你可以多测几下。。看看
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想要走得快，就单独上路；想要走得远，就结伴同行！！
5楼2011-11-22 14:20:28
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stone_f

铜虫 (初入文坛)
楼主你在摇瓶培养的时候氮源是不是只用了奶粉，建议你考虑下培养基中加一部分蛋白胨或者无机氮源，以供菌体前期生长用
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6楼2011-11-22 18:53:47
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biolio2009

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

zhangyt7638(金币+2): 非常感谢 2011-11-25 09:47:16
楼主  这个必须测定蛋白酶活力，这个很简单啊  就有国标可用，
而且 培养基用奶粉 代价也太大了吧，玉米粉我们用的 就非常好啊
而且成本也很低的，换一下 试试
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7楼2011-11-23 09:03:31
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xzhiqiang

禁虫 (正式写手)
本帖内容被屏蔽
8楼2011-11-23 15:30:28
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icz

金虫 (小有名气)
★
zhang8826857(金币+1): 鼓励交流 2011-11-30 12:42:05
酪蛋白平板筛选法只是反应蛋白酶活力的一个初筛标准，需要进一步确定其蛋白酶活力是否真高；
如果确实高，需要优化你的液态培养条件，包括培养基、培养工艺等；
另外，强调一点，固态培养产酶和液态培养产酶条件差别很大，也与菌株特性相关，常常需要专用菌株。
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今生的追求大于我的生命!
9楼2011-11-30 11:26:34
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thinkreed

铁虫 (小有名气)
我也在在做蛋白酶菌种的筛选，发现酶活跟透明圈有一定关系但不是绝对的，有些菌株有透明圈却没有酶活
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10楼2014-05-27 16:30:38
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