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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » PCR 总是呈现涂抹状 求解答！
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老夏853

铁杆木虫 (著名写手)

[交流] PCR 总是呈现涂抹状 求解答！ 已有16人参与

最近做pcr 总是呈现这种涂抹状，原来一直以为是用的taq 酶 mix 没有反应完所致 ，今天专门点了两个孔的 mix 结果泳道是干净的 也不知道这样的抹带究竟是什么原因造成的 请做PCR 经验丰富的朋友指点  电泳图片 就这样的


有时候p 出来 也会有这种抹带的样子
照片这样的



[ Last edited by 老夏853 on 2011-9-14 at 18:00 ]
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1楼 2011-09-14 17:17:15
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小鸟剑客

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
是不是跑电泳的问题啊，
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2楼2011-09-14 19:19:39
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天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen
★ ★ ★
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wanhscn(金币+2): 同意！ 2011-09-15 08:49:04
pcr体系不太合适。。。。
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Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
3楼2011-09-14 20:30:03
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cloverplm

金虫 (小有名气)
★ ★ ★
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西瓜(金币+2): 四叶草MM很活跃哦 2011-09-14 22:19:34
一个个排除吧！胶，电泳条件（电压，缓冲液，电泳时间等）， 引物，PCR条件等。另外你加样的时候要注意下，有不少挂孔的啊！
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净——静——竞——进
4楼2011-09-14 20:30:53
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老夏853

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 天使托 at 2011-09-14 20:30:03:
pcr体系不太合适。。。。

能详细点么 ？？ 最好  着急 急求11
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5楼2011-09-14 20:45:28
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wanhscn

木虫 (职业作家)

哲学@草根
★
西瓜(金币+1): good 2011-09-16 17:39:43
http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=3571591&page=1#pid1141331
推荐参考！

模板有问题否？
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真相是最大的奢侈品
6楼2011-09-15 08:51:08
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老夏853

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by wanhscn at 2011-09-15 08:51:08:
http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=3571591&page=1#pid1141331
推荐参考！

模板有问题否？

你推荐的帖子里面没有说怎么解决这种涂抹状条带的方法啊    哎 求助 求助 啊
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7楼2011-09-16 11:28:54
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wanhscn

木虫 (职业作家)

哲学@草根
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
1949stone(金币+1): 同意第二条 2011-09-17 08:32:53
1 特异性不好 可参照
2 模板降解的厉害的话也会产生这种smear
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真相是最大的奢侈品
8楼2011-09-16 11:37:05
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madengyu

禁虫 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
西瓜(金币+1): 欢迎交流 2011-09-16 17:40:06
本帖内容被屏蔽
9楼2011-09-16 12:08:09
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老夏853

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
9楼: Originally posted by madengyu at 2011-09-16 12:08:09:
往成像仪放胶的的那个板擦干净了吗？

额 那个确实不干净     还有个气泡   
可是重点  我感觉这个涂抹状条带跟电泳关系不是很大 应该是pcr 体系的问题 我急需 做pcr 经验丰富的 虫子帮我指点指点 毕竟 我自己摸索 好花费很长时间~~
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10楼2011-09-16 13:49:44
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