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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » PCR 总是呈现涂抹状 求解答！
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老夏853

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
20楼: Originally posted by wanhscn at 2011-09-17 10:29:09:
哦,模板很好啊!

额 那究竟怎么回事呢 ？
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21楼2011-09-17 12:29:20
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老夏853

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
19楼: Originally posted by ganchao1776 at 2011-09-17 10:14:28:
如果是这种情况的话跟预变性没有什么关系的，主要退火，和延伸，所以不太好通过改变条件来解决；其实多分几管进行PCR就好了

我本来做的就是25ul  体系      考虑到蒸发的  做完 有的管子不严 可能只剩20ul 左右了
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22楼2011-09-17 12:30:43
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ganchao1776

至尊木虫 (职业作家)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
dhd997(金币+2): 2011-09-20 07:59:31
引用回帖:
22楼: Originally posted by 老夏853 at 2011-09-17 12:30:43:
我本来做的就是25ul  体系      考虑到蒸发的  做完 有的管子不严 可能只剩20ul 左右了

这么小的体系了，如果仪器没有问题就可能不是我说的这种原因了
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23楼2011-09-17 13:12:47
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wanhscn

木虫 (职业作家)

哲学@草根
引用回帖:
22楼: Originally posted by 老夏853 at 2011-09-17 12:30:43:
我本来做的就是25ul  体系      考虑到蒸发的  做完 有的管子不严 可能只剩20ul 左右了

你没加石蜡油？
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真相是最大的奢侈品
24楼2011-09-17 14:12:16
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惟我独尊

金虫 (小有名气)
★ ★ ★
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dhd997(金币+2): 加菲猫，呵呵 2011-09-20 07:59:56
你这种情况排除了模板降解的话，你再ＰＣＲ的时候把你的模板稀释个１００倍后，再Ｐ！我曾经出现过这种情况，稀释后就ＯＫ了。
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25楼2011-09-17 15:37:41
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老夏853

铁杆木虫 (著名写手)
内容已删除
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26楼2011-09-17 16:32:26
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老夏853

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
25楼: Originally posted by 惟我独尊 at 2011-09-17 15:37:41:
你这种情况排除了模板降解的话，你再ＰＣＲ的时候把你的模板稀释个１００倍后，再Ｐ！我曾经出现过这种情况，稀释后就ＯＫ了。

好吧 目前我已经稀释过10倍，20倍，50倍~~ 还是没有条带 就是那种弥散的样子
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27楼2011-09-17 16:33:11
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wanhscn

木虫 (职业作家)

哲学@草根
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
26楼: Originally posted by 老夏853 at 2011-09-17 16:32:26:
没  
后面还要用pcr 产物做进一步实验

加石蜡油可以防止挥发
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真相是最大的奢侈品
28楼2011-09-17 21:00:57
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xmckyltwx

木虫 (正式写手)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
dhd997(金币+2): 鼓励交流 2011-09-20 08:00:08
你可以考虑一下模板浓度是否过高，还是退火温度有点低的问题
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成功的起点是坚信，成功的终点是坚持~~
29楼2011-09-18 10:23:49
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老夏853

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
29楼: Originally posted by xmckyltwx at 2011-09-18 10:23:49:
你可以考虑一下模板浓度是否过高，还是退火温度有点低的问题

模板  我稀释10倍，20倍，50倍，100倍 ，按照原来的退火条件做的 都没有结果 也一样的弥散
退火温度 现在正在试 ，一度一度的加高。‘
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30楼2011-09-18 17:01:00
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