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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » PCR 总是呈现涂抹状 求解答！
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ganchao1776

至尊木虫 (职业作家)
是你的仪器支技不了你所选的体系，打个比方，25ul体系能p的很好，但50ul就不一定，把你的全体系做的小一点再试试吧

纯个人意见啊
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11楼2011-09-16 23:49:56
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xbtwomen

金虫 (小有名气)
★
wanhscn(金币+1): 同意! 2011-09-17 09:25:35
DNA是否降解了
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12楼2011-09-17 08:32:55
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wanhscn

木虫 (职业作家)

哲学@草根
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
可以跑一下模板,看看模板质量如何!
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真相是最大的奢侈品
13楼2011-09-17 09:19:43
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synhily

木虫 (正式写手)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
dhd997(金币+2): 鼓励交流 2011-09-17 10:40:37
1 电压小一点，弄个70或者80v，重跑一次。
2 如果不行，检查自己的PCR体系，我觉得时你加样是有污染，或者电泳后跑胶弄得污染了。
3 还是不行，那就只能重新摸索PCR体系了。祝好！
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14楼2011-09-17 09:30:41
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老夏853

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
13楼: Originally posted by wanhscn at 2011-09-17 09:19:43:
可以跑一下模板,看看模板质量如何!

我也曾经怀疑过时模板的问题 昨天重新电泳模板 效果还可以
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15楼2011-09-17 09:55:11
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老夏853

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
14楼: Originally posted by synhily at 2011-09-17 09:30:41:
1 电压小一点，弄个70或者80v，重跑一次。
2 如果不行，检查自己的PCR体系，我觉得时你加样是有污染，或者电泳后跑胶弄得污染了。
3 还是不行，那就只能重新摸索PCR体系了。祝好！

电泳  条件 我感觉 影响不大 因为一样的条件做其他 都好 maker 也没问题
另外 加样污染的 话 我也试过在超净台里面做  哎 真是能想到的 都试过了
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16楼2011-09-17 09:57:17
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老夏853

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
11楼: Originally posted by ganchao1776 at 2011-09-16 23:49:56:
是你的仪器支技不了你所选的体系，打个比方，25ul体系能p的很好，但50ul就不一定，把你的全体系做的小一点再试试吧

纯个人意见啊

如果 是这种情况   体系 体积  应该是跟传热传质 有关  我用 的扩增程序 时间是90,90,2，预变性 原来94,5min，我改成95,5min， ~
赞一下 回复此楼
17楼2011-09-17 10:09:39
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老夏853

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
12楼: Originally posted by xbtwomen at 2011-09-17 08:32:55:
DNA是否降解了

14楼 有模板电泳图
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18楼2011-09-17 10:10:47
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ganchao1776

至尊木虫 (职业作家)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
dhd997(金币+2): 鼓励交流 2011-09-17 10:40:49
引用回帖:
17楼: Originally posted by 老夏853 at 2011-09-17 10:09:39:
如果 是这种情况   体系 体积  应该是跟传热传质 有关  我用 的扩增程序 时间是90,90,2，预变性 原来94,5min，我改成95,5min， ~

如果是这种情况的话跟预变性没有什么关系的，主要退火，和延伸，所以不太好通过改变条件来解决；其实多分几管进行PCR就好了
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19楼2011-09-17 10:14:28
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wanhscn

木虫 (职业作家)

哲学@草根
引用回帖:
15楼: Originally posted by 老夏853 at 2011-09-17 09:55:11:
我也曾经怀疑过时模板的问题 昨天重新电泳模板 效果还可以

哦,模板很好啊!
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真相是最大的奢侈品
20楼2011-09-17 10:29:09
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