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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » PCR 总是呈现涂抹状 求解答！
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老夏853

铁杆木虫 (著名写手)

[交流] PCR 总是呈现涂抹状 求解答！ 已有16人参与

最近做pcr 总是呈现这种涂抹状，原来一直以为是用的taq 酶 mix 没有反应完所致 ，今天专门点了两个孔的 mix 结果泳道是干净的 也不知道这样的抹带究竟是什么原因造成的 请做PCR 经验丰富的朋友指点  电泳图片 就这样的


有时候p 出来 也会有这种抹带的样子
照片这样的



[ Last edited by 老夏853 on 2011-9-14 at 18:00 ]
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1楼 2011-09-14 17:17:15
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ganchao1776

至尊木虫 (职业作家)
★ ★ ★
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dhd997(金币+2): 鼓励交流 2011-09-17 10:40:49
引用回帖:
17楼: Originally posted by 老夏853 at 2011-09-17 10:09:39:
如果 是这种情况   体系 体积  应该是跟传热传质 有关  我用 的扩增程序 时间是90,90,2，预变性 原来94,5min，我改成95,5min， ~

如果是这种情况的话跟预变性没有什么关系的，主要退火，和延伸，所以不太好通过改变条件来解决；其实多分几管进行PCR就好了
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19楼2011-09-17 10:14:28
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小鸟剑客

金虫 (小有名气)
★
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是不是跑电泳的问题啊，
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2楼2011-09-14 19:19:39
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天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen
★ ★ ★
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wanhscn(金币+2): 同意！ 2011-09-15 08:49:04
pcr体系不太合适。。。。
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Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
3楼2011-09-14 20:30:03
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cloverplm

金虫 (小有名气)
★ ★ ★
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西瓜(金币+2): 四叶草MM很活跃哦 2011-09-14 22:19:34
一个个排除吧！胶，电泳条件（电压，缓冲液，电泳时间等）， 引物，PCR条件等。另外你加样的时候要注意下，有不少挂孔的啊！
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净——静——竞——进
4楼2011-09-14 20:30:53
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