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老夏853

铁杆木虫 (著名写手)

[交流] PCR 总是呈现涂抹状 求解答!已有16人参与

最近做pcr 总是呈现这种涂抹状,原来一直以为是用的taq 酶 mix 没有反应完所致 ,今天专门点了两个孔的 mix 结果泳道是干净的 也不知道这样的抹带究竟是什么原因造成的 请做PCR 经验丰富的朋友指点  电泳图片 就这样的


有时候p 出来 也会有这种抹带的样子
照片这样的



[ Last edited by 老夏853 on 2011-9-14 at 18:00 ]
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老夏853

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
11楼: Originally posted by ganchao1776 at 2011-09-16 23:49:56:
是你的仪器支技不了你所选的体系,打个比方,25ul体系能p的很好,但50ul就不一定,把你的全体系做的小一点再试试吧

纯个人意见啊

如果 是这种情况   体系 体积  应该是跟传热传质 有关  我用 的扩增程序 时间是90,90,2,预变性 原来94,5min,我改成95,5min, ~
17楼2011-09-17 10:09:39
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小鸟剑客

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
是不是跑电泳的问题啊,
2楼2011-09-14 19:19:39
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天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen

★ ★ ★
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wanhscn(金币+2): 同意! 2011-09-15 08:49:04
pcr体系不太合适。。。。
Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
3楼2011-09-14 20:30:03
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cloverplm

金虫 (小有名气)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
西瓜(金币+2): 四叶草MM很活跃哦 2011-09-14 22:19:34
一个个排除吧!胶,电泳条件(电压,缓冲液,电泳时间等), 引物,PCR条件等。另外你加样的时候要注意下,有不少挂孔的啊!
净——静——竞——进
4楼2011-09-14 20:30:53
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