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匿名

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1楼 2011-08-29 20:33:47

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yemuren

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【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
西瓜(金币+5, MolEPI+1): Good！ 2011-08-30 18:34:20
facingworld(金币+1): 谢谢啦！我刚看了一下，突变处的峰值信号都很强，估计我P的有问题咯，重新吧！ 2011-08-30 21:22:40

首先，你可以看看测序图谱，如果突变碱基处峰图信号强，没有杂峰，说明测序是没有问题的，那就应该是PCR过程中突变了，然后你可以做以下选择：
1：设计诱变引物，把突变位点诱变回去，这个有点麻烦，耗时长，不推荐使用；2：使用高保真酶，重P一次，然后用普通的Tag酶加上a尾巴，就可以做TA克隆测序了。循环数少一些，30足够了。

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我的专长叫做流浪，所以我就做了流氓~

7楼2011-08-30 10:34:07

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