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yemuren

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
西瓜(金币+5, MolEPI+1): Good! 2011-08-30 18:34:20
facingworld(金币+1): 谢谢啦!我刚看了一下,突变处的峰值信号都很强,估计我P的有问题咯,重新吧! 2011-08-30 21:22:40
首先,你可以看看测序图谱,如果突变碱基处峰图信号强,没有杂峰,说明测序是没有问题的,那就应该是PCR过程中突变了,然后你可以做以下选择:
1:设计诱变引物,把突变位点诱变回去,这个有点麻烦,耗时长,不推荐使用;2:使用高保真酶,重P一次,然后用普通的Tag酶加上a尾巴,就可以做TA克隆测序了。循环数少一些,30足够了。
我的专长叫做流浪,所以我就做了流氓~
7楼2011-08-30 10:34:07
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