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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » ppic9k质粒双酶切
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qwky2010

金虫 (著名写手)

[交流] ppic9k质粒双酶切

我用这个9k质粒发现，双酶切后质粒跑的比没有酶切时还要快，这样正常吗，谢谢了
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1楼 2011-06-25 16:59:46
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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by gwbk at 2011-06-26 00:29:55:
酶切时间太长，可能有非特异性切割。可以切3个小时试试。
另外，NotI和EcoRI的buffer是1×H+BSA，BSA终浓度100ug/ml。

你说的是TAKALA公司的缓冲液，他用的是Fermentas公司的酶，推荐给他的缓冲液没错，是在该公司网站帮他查的。
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9楼2011-06-26 10:37:55
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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)
★ ★ ★
qwky2010(金币+1):谢谢参与
西瓜(金币+2): 欢迎交流。顺便请教下，具体怎么说呢？ 2011-06-25 18:24:46
看你用的是什么酶了。
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qwky2010
2楼2011-06-25 17:19:16
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西瓜

荣誉版主 (知名作家)
★
qwky2010(金币+1):谢谢参与
以前有人讨论过这个问题，酶切后的质粒有时候是会比没有切的跑得更快。跟Marker比较下，大小对了就没问题了。
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3楼2011-06-25 18:20:42
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qwky2010

金虫 (著名写手)
送鲜花一朵
引用回帖:
Originally posted by lxj341401 at 2011-06-25 17:19:16:
看你用的是什么酶了。

谢谢你昨天和今天的回复，我用的是not1和ecoR1这两个酶，体系是你昨天发给我的，不知道该怎么办，多多指点谢谢~
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4楼2011-06-25 20:49:23
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