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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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shihongling

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】将PPIC9K质粒转化到DH5a上怎么总不成功 已有7人参与

我将目的基因与酶切过的PPIC9K在16度连接了20多个小时,之后转化到DH5a中,涂板后12个小时没有长起来,请教各位分析下是什么原因?
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seahow

木虫 (著名写手)

涂板大于16小时,你再试试!!
2楼2010-07-28 08:31:00
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shihongling

金虫 (小有名气)

我同时做了个对照,把空的PPIC9K转到DH5a中不到12个小时就长了好多单菌落了……
3楼2010-07-28 09:56:16
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louli

铜虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
确定连上了吗?
4楼2010-07-28 10:31:57
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susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
我觉得是个好现象,至少说明你载体切得干净,没有假阳性,比整板子长满假阳性好多了。换连接酶试试,应该是没连上。
Thank-you,so-blue.
5楼2010-07-28 10:35:23
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fungixx

至尊木虫 (文坛精英)

优秀版主优秀版主优秀版主


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
酶切回收后的目的片段和质粒做电泳检测了吗,估计是连接之前出的问题
几年前踏上火车那一刻都还没有意识到,从此故乡只有冬夏,再无春秋
6楼2010-07-28 11:46:18
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skyqiuqiu119

木虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
酶切和酶连接完成后,都要电泳检查的,这样才能保证转化之前的正确性。
哎哟~可爱QQ~不错哦~~
7楼2010-07-28 16:26:54
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shihongling

金虫 (小有名气)

谢谢大家啦!
8楼2010-07-29 20:52:05
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趁风依旧

金虫 (小有名气)

初入文坛


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
7楼: Originally posted by skyqiuqiu119 at 2010-07-28 16:26:54
酶切和酶连接完成后,都要电泳检查的,这样才能保证转化之前的正确性。

连接完之后怎么电泳检查?拷贝数不够的啊?可以的吗?
随波逐流的人注定没有完整的人生
9楼2013-12-28 16:27:15
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