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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 动植物 » 综合其他 » 双元载体转化实验～总是失败
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静雨轩425

铁虫 (初入文坛)

[求助] 双元载体转化实验～总是失败

各位大神，我将师姐们克隆好的基因转化农杆菌时，总是不长斑，重复很多次，培养基LBYEB都用了，都不长，求高手指点下，有注意事项什么的吗？

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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1楼 2013-04-11 23:28:03
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starseacow

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
静雨轩425: 金币+5 2013-04-19 10:25:26
楼主描述的不是很清楚，不好做出准确判断，但可以考虑从以下几方面检查
1 和你的师姐讨论一下，确认载体构建没有问题，另外，了解一下使用该载体，转化其他类似基因时是否成功
2 重新制备感受态农杆菌
3 检查你的转化方法，看是否有问题
4 抗生素用对了么？
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植物生理群69993869，为避免广告，申请加入请提供木虫昵称，院校及专业信息
2楼2013-04-12 20:06:46
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静雨轩425

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by starseacow at 2013-04-12 20:06:46
楼主描述的不是很清楚，不好做出准确判断，但可以考虑从以下几方面检查
1 和你的师姐讨论一下，确认载体构建没有问题，另外，了解一下使用该载体，转化其他类似基因时是否成功
2 重新制备感受态农杆菌
3 检查你的 ...

找了找原因，大家觉得实验室得熏蒸了！！！！！！！
赞一下 回复此楼
3楼2013-04-19 10:25:09
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liaoyh

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 静雨轩425 at 2013-04-19 10:25:09
找了找原因，大家觉得实验室得熏蒸了！！！！！！！...

农杆菌转化后含有三抗，即使不在超净台上操作问题都不大，你现在的问题不是污染而是长不出菌落，建议看看抗生素是否正确？感受态怎么样？
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2013-04-26 18:37:14
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