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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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静雨轩425

铁虫 (初入文坛)

[求助] 双元载体转化实验~总是失败

各位大神,我将师姐们克隆好的基因转化农杆菌时,总是不长斑,重复很多次,培养基LBYEB都用了,都不长,求高手指点下,有注意事项什么的吗?

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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liaoyh

铁杆木虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 静雨轩425 at 2013-04-19 10:25:09
找了找原因,大家觉得实验室得熏蒸了!!!!!!!...

农杆菌转化后含有三抗,即使不在超净台上操作问题都不大,你现在的问题不是污染而是长不出菌落,建议看看抗生素是否正确?感受态怎么样?
4楼2013-04-26 18:37:14
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starseacow

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
静雨轩425: 金币+5 2013-04-19 10:25:26
楼主描述的不是很清楚,不好做出准确判断,但可以考虑从以下几方面检查
1 和你的师姐讨论一下,确认载体构建没有问题,另外,了解一下使用该载体,转化其他类似基因时是否成功
2 重新制备感受态农杆菌
3 检查你的转化方法,看是否有问题
4 抗生素用对了么?
植物生理群69993869,为避免广告,申请加入请提供木虫昵称,院校及专业信息
2楼2013-04-12 20:06:46
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静雨轩425

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by starseacow at 2013-04-12 20:06:46
楼主描述的不是很清楚,不好做出准确判断,但可以考虑从以下几方面检查
1 和你的师姐讨论一下,确认载体构建没有问题,另外,了解一下使用该载体,转化其他类似基因时是否成功
2 重新制备感受态农杆菌
3 检查你的 ...

找了找原因,大家觉得实验室得熏蒸了!!!!!!!
3楼2013-04-19 10:25:09
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