24小时热门版块排行榜    

查看: 1159  |  回复: 3

静雨轩425

铁虫 (初入文坛)

[求助] 双元载体转化实验~总是失败

各位大神,我将师姐们克隆好的基因转化农杆菌时,总是不长斑,重复很多次,培养基LBYEB都用了,都不长,求高手指点下,有注意事项什么的吗?

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

starseacow

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
静雨轩425: 金币+5 2013-04-19 10:25:26
楼主描述的不是很清楚,不好做出准确判断,但可以考虑从以下几方面检查
1 和你的师姐讨论一下,确认载体构建没有问题,另外,了解一下使用该载体,转化其他类似基因时是否成功
2 重新制备感受态农杆菌
3 检查你的转化方法,看是否有问题
4 抗生素用对了么?
植物生理群69993869,为避免广告,申请加入请提供木虫昵称,院校及专业信息
2楼2013-04-12 20:06:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

静雨轩425

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by starseacow at 2013-04-12 20:06:46
楼主描述的不是很清楚,不好做出准确判断,但可以考虑从以下几方面检查
1 和你的师姐讨论一下,确认载体构建没有问题,另外,了解一下使用该载体,转化其他类似基因时是否成功
2 重新制备感受态农杆菌
3 检查你的 ...

找了找原因,大家觉得实验室得熏蒸了!!!!!!!
3楼2013-04-19 10:25:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liaoyh

铁杆木虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 静雨轩425 at 2013-04-19 10:25:09
找了找原因,大家觉得实验室得熏蒸了!!!!!!!...

农杆菌转化后含有三抗,即使不在超净台上操作问题都不大,你现在的问题不是污染而是长不出菌落,建议看看抗生素是否正确?感受态怎么样?
4楼2013-04-26 18:37:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 静雨轩425 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +4 k0dTPqJtl0jt 2026-08-14 4/200 2026-08-15 01:40 by 4wMiSEwB6436
[基金申请] 各位道友,我要去昆明玩几天,回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
[教师之家] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 7lpolszZVXgi 2026-08-14 4/200 2026-08-15 01:08 by 4wMiSEwB6436
[教师之家] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 HFw0lei2R37i 2026-08-14 5/250 2026-08-14 22:32 by 4wMiSEwB6436
[基金申请] 奇怪,两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +8 布布和一二 2026-08-10 11/550 2026-08-14 14:58 by Equinoxhua
[基金申请] 有时候,自然基金真的不能太认真 (我的申报经验) +6 majunge000 2026-08-11 8/400 2026-08-14 14:44 by 医学老男孩
[基金申请] 应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键 +23 Lanmanbaby 2026-08-09 37/1850 2026-08-14 13:40 by Equinoxhua
[论文投稿] 职称评审,求友友推荐见刊最快的期刊 +5 工厂打螺丝 2026-08-08 5/250 2026-08-14 11:03 by 玖戈弋
[基金申请] FileCode能看出啥? +10 要乐观耀哥 2026-08-10 32/1600 2026-08-14 09:37 by 要乐观耀哥
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] Filecode 又变了,巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见,大家看看几个A,几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +6 瞬息宇宙 2026-08-10 7/350 2026-08-11 19:25 by Tide man
[基金申请] 什么时候出结果,有咨询渠道??? +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[基金申请] 确定了,国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
[基金申请] 2026国自然放榜时间 +9 布布和一二 2026-08-08 9/450 2026-08-10 11:22 by xxxx2020
[基金申请] 面上项目filecode邪修 +5 西山十月 2026-08-09 7/350 2026-08-10 07:32 by 仁砚薪传
[基金申请] fileCode有新解读? +10 Tide man 2026-08-08 18/900 2026-08-09 12:55 by 仁砚薪传
[基金申请] 关于filecode,很负责任的告诉大家 +6 爱看书的可乐 2026-08-08 7/350 2026-08-08 22:13 by a_niu
信息提示
请填处理意见