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shihongling

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】将PPIC9K质粒转化到DH5a上怎么总不成功 已有7人参与

我将目的基因与酶切过的PPIC9K在16度连接了20多个小时,之后转化到DH5a中,涂板后12个小时没有长起来,请教各位分析下是什么原因?
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趁风依旧

金虫 (小有名气)

初入文坛


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
7楼: Originally posted by skyqiuqiu119 at 2010-07-28 16:26:54
酶切和酶连接完成后,都要电泳检查的,这样才能保证转化之前的正确性。

连接完之后怎么电泳检查?拷贝数不够的啊?可以的吗?
随波逐流的人注定没有完整的人生
9楼2013-12-28 16:27:15
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查看全部 9 个回答

seahow

木虫 (著名写手)

涂板大于16小时,你再试试!!
2楼2010-07-28 08:31:00
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shihongling

金虫 (小有名气)

我同时做了个对照,把空的PPIC9K转到DH5a中不到12个小时就长了好多单菌落了……
3楼2010-07-28 09:56:16
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susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
我觉得是个好现象,至少说明你载体切得干净,没有假阳性,比整板子长满假阳性好多了。换连接酶试试,应该是没连上。
Thank-you,so-blue.
5楼2010-07-28 10:35:23
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