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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】将PPIC9K质粒转化到ＤＨ５ａ上怎么总不成功
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shihongling

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】将PPIC9K质粒转化到ＤＨ５ａ上怎么总不成功 已有7人参与

我将目的基因与酶切过的ＰＰＩＣ９Ｋ在１６度连接了２０多个小时，之后转化到ＤＨ５ａ中，涂板后１２个小时没有长起来，请教各位分析下是什么原因？
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1楼 2010-07-28 08:21:32
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skyqiuqiu119

木虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
酶切和酶连接完成后，都要电泳检查的，这样才能保证转化之前的正确性。
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哎哟~可爱QQ~不错哦~~
7楼2010-07-28 16:26:54
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seahow

木虫 (著名写手)
涂板大于16小时，你再试试！！
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2楼2010-07-28 08:31:00
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shihongling

金虫 (小有名气)
我同时做了个对照，把空的ＰＰＩＣ９Ｋ转到ＤＨ５ａ中不到１２个小时就长了好多单菌落了……
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3楼2010-07-28 09:56:16
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susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
我觉得是个好现象，至少说明你载体切得干净，没有假阳性，比整板子长满假阳性好多了。换连接酶试试，应该是没连上。
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Thank-you，so-blue.
5楼2010-07-28 10:35:23
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