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shihongling

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】将PPIC9K质粒转化到DH5a上怎么总不成功 已有7人参与

我将目的基因与酶切过的PPIC9K在16度连接了20多个小时,之后转化到DH5a中,涂板后12个小时没有长起来,请教各位分析下是什么原因?
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fungixx

至尊木虫 (文坛精英)

优秀版主优秀版主优秀版主


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
酶切回收后的目的片段和质粒做电泳检测了吗,估计是连接之前出的问题
几年前踏上火车那一刻都还没有意识到,从此故乡只有冬夏,再无春秋
6楼2010-07-28 11:46:18
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seahow

木虫 (著名写手)

涂板大于16小时,你再试试!!
2楼2010-07-28 08:31:00
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shihongling

金虫 (小有名气)

我同时做了个对照,把空的PPIC9K转到DH5a中不到12个小时就长了好多单菌落了……
3楼2010-07-28 09:56:16
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susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
我觉得是个好现象,至少说明你载体切得干净,没有假阳性,比整板子长满假阳性好多了。换连接酶试试,应该是没连上。
Thank-you,so-blue.
5楼2010-07-28 10:35:23
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