24小时热门版块排行榜

返回列表

gaochaohui

新虫 (小有名气)

应助: 1 (幼儿园)
金币: 31.7
帖子: 161
在线: 72.6小时
虫号: 862261

[交流] 【求助/交流】蛋白表达求助

用大肠杆菌作为宿主细胞表达一种蛋白质，导入含有目的基因的质粒后，在含有标记抗生素的LB培养基上长出了单菌落。IPTG诱导培养后，破菌做电泳，在上清和沉淀中都没有明显的目的蛋白的条带。有可能是什么原因呢？我专业不是学生物的，求比较了解这方面的虫友指点一下。

回复此楼

» 猜你喜欢

HILIC磁珠研究蛋白组学怎么做？已经有0人回复
His标签蛋白纯化怎么才能快？已经有0人回复
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费? 已经有110人回复
WRN变构抑制剂HRO761：从D1/D2界面锁定到MSI合成致死的工具化合物深度解析已经有0人回复
KRAS G12V(ON) 选择性抑制剂 RMC-5127：从三元复合物机制到科研应用已经有0人回复
SHP2 变构抑制剂 Sitneprotafib：从作用机制到科研试剂选型要点已经有0人回复
PRMT5·MTA 抑制剂 MRTX1719 的科研应用已经有0人回复
SW033291 科研使用解析：分子特征、储存与实验获取要点已经有0人回复
泛 RAS 抑制新思路：大环肽拟似物如何同时牵住突变型与野生型 RAS？已经有0人回复
TYK2/JAK1 双靶点工具化合物 Brepocitinib：激酶选择性、研究进展与实验应用全解析已经有0人回复
矢车菊素-3-O-葡萄糖苷质控实录：从一张HPLC图谱读懂纯度与稳定性已经有0人回复

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

1楼 2011-01-20 11:45:18

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

★
rainwander(金币+1): 这都有可能~~~ 2011-01-20 13:32:45
gaochaohui(金币+1): 2011-01-20 16:53:28

蛋白没表达。可能是宿主不合适或者载体不合适

赞一下(1人)

回复此楼

2楼2011-01-20 12:32:16

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

zhougama

禁虫 (正式写手)

★
rainwander(金币+1): 是的，应该首先鉴定正确后在做表达的 2011-01-20 13:33:08
gaochaohui(金币+2): 2011-01-20 16:53:36

本帖内容被屏蔽

3楼2011-01-20 12:37:33

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

biowandy

木虫 (正式写手)

应助: 3 (幼儿园)
金币: 4752.3
帖子: 627
在线: 157.8小时
虫号: 382870

★
rainwander(金币+1): 很正确，呵呵，鼓励积极参与~~~ 2011-01-20 13:33:26
gaochaohui(金币+2): 2011-01-20 16:53:42

引用回帖:

Originally posted by gaochaohui at 2011-01-20 11:45:18:
用大肠杆菌作为宿主细胞表达一种蛋白质，导入含有目的基因的质粒后，在含有标记抗生素的LB培养基上长出了单菌落。IPTG诱导培养后，破菌做电泳，在上清和沉淀中都没有明显的目的蛋白的条带。有可能是什么原因呢？我 ...

你转化后挑了单克隆腰测序的，、测序确认你转进去了那个目的基因才能进行后续的表达。

赞一下(1人)

回复此楼

4楼2011-01-20 13:01:45

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖