应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】蛋白表达求助
51/1返回列表
查看: 1562  |  回复: 10
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

gaochaohui

新虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】蛋白表达求助

用大肠杆菌作为宿主细胞表达一种蛋白质，导入含有目的基因的质粒后，在含有标记抗生素的LB培养基上长出了单菌落。IPTG诱导培养后，破菌做电泳，在上清和沉淀中都没有明显的目的蛋白的条带。有可能是什么原因呢？我专业不是学生物的，求比较了解这方面的虫友指点一下。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2011-01-20 11:45:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gaochaohui

新虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by biowandy at 2011-01-20 13:01:45:





你转化后挑了单克隆腰测序的，、测序确认你转进去了那个目的基因才能进行后续的表达。

我们实验室没有条件进行基因测序，所以选择做电泳，通过电泳条带的对比来判断目的蛋白是否得到表达。如果排除上面的虫友所说的可能的原因，质粒正确。还会有其他的原因吗？谢谢各位虫友。
赞一下 回复此楼
5楼2011-01-20 17:06:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答

brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)
★
rainwander(金币+1): 这都有可能~~~ 2011-01-20 13:32:45
gaochaohui(金币+1): 2011-01-20 16:53:28
蛋白没表达。可能是宿主不合适或者载体不合适
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2011-01-20 12:32:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhougama

禁虫 (正式写手)
★
rainwander(金币+1): 是的，应该首先鉴定正确后在做表达的 2011-01-20 13:33:08
gaochaohui(金币+2): 2011-01-20 16:53:36
本帖内容被屏蔽
3楼2011-01-20 12:37:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

biowandy

木虫 (正式写手)
★
rainwander(金币+1): 很正确，呵呵，鼓励积极参与~~~ 2011-01-20 13:33:26
gaochaohui(金币+2): 2011-01-20 16:53:42
引用回帖:
Originally posted by gaochaohui at 2011-01-20 11:45:18:
用大肠杆菌作为宿主细胞表达一种蛋白质，导入含有目的基因的质粒后，在含有标记抗生素的LB培养基上长出了单菌落。IPTG诱导培养后，破菌做电泳，在上清和沉淀中都没有明显的目的蛋白的条带。有可能是什么原因呢？我 ...

你转化后挑了单克隆腰测序的，、测序确认你转进去了那个目的基因才能进行后续的表达。
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2011-01-20 13:01:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭