| 查看: 2285 | 回复: 15 | ||||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||||
[交流]
【求助/交流】如何高度纯化蛋白，急急急 已有7人参与
|
||||
| 我是用strep-tag，纯化蛋白后跑sds-page，总是有很多扎带，如何能高度纯化蛋白呢，就只得到目的条带 |
回复此楼» 猜你喜欢
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有239人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 【求助/交流】求助 如何查找已知基因的表达部位和功能
已经有1人回复
- 【求助/交流】如何从GENBANK上查询菌株的的Acession No
已经有5人回复
- 【求助/交流】这种情况下如何做荧光定量啊
已经有4人回复
- 【求助/交流】his标签蛋白纯化
已经有12人回复
- 【求助/交流】【高分求助】请教大虾的建议!!!!! 结构生物学的前景怎样？ 好找工作吗？
已经有13人回复
- 【求助/交流】水抽提法 DNA提取
已经有14人回复
- 【求助/交流】提取DNA
已经有18人回复
- 【求助/交流】酵母细胞壁如何纯化
已经有8人回复
- 【求助/交流】高蛋白产品如何杀菌？比如蛋白粉
已经有8人回复
- 【求助/交流】蛋白降解严重，求救！
已经有12人回复
- 【求助/交流】如何降低，多克隆抗体非特异性？
已经有12人回复
- 【求助/交流】请教如何用乙醇沉淀法纯化回收DNA
已经有1人回复
- 【求助/交流】论文重合率
已经有4人回复
- 【求助/交流】提取叶片总糖如何去除叶绿素
已经有2人回复
- 【求助/交流】如何提高质粒拷贝数
已经有4人回复
- 【求助/交流】【求助】细菌未知功能基因的克隆方法
已经有14人回复
- 【求助/交流】如何体高淀粉酶活力
已经有11人回复
- 【求助/交流】高葡萄糖培养基如何IPTG诱导？
已经有1人回复
- 【求助/交流】扩增酶选择
已经有4人回复
- 【求助/交流】高分子kd值测定
已经有3人回复
- 【求助/交流】糖蛋白如何去除糖
已经有2人回复
- 【求助/交流】纤维素酶
已经有2人回复
- 【求助/交流】酵母高密度发酵的补料策略
已经有1人回复
- 【求助/交流】求助：如何选择凝胶成像仪？
已经有11人回复
- 【求助/交流】绒毛高度测量方法
已经有3人回复
- 【求助/交流】有关菌液PCR的问题
已经有14人回复
- 【求助/交流】关于电泳
已经有6人回复
月月大可
木虫 (著名写手)
- MolEPI: 3
- 应助: 13 (小学生)
- 金币: 3272.1
- 散金: 1393
- 红花: 17
- 帖子: 1674
- 在线: 295.7小时
- 虫号: 549127
- 注册: 2008-04-20
- 性别: GG
- 专业: 生物化学
9楼2010-08-11 23:41:06
sqhnsd
金虫 (正式写手)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 515.3
- 散金: 100
- 帖子: 412
- 在线: 56.9小时
- 虫号: 1045397
- 注册: 2010-06-22
- 性别: GG
- 专业: 蛋白质组学
2楼2010-08-11 13:49:29
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
|
本帖内容被屏蔽 |
3楼2010-08-11 13:49:49
冼亮淀粉酶
专家顾问 (知名作家)
生物大分子降解酶
-
专家经验: +248 - MolEPI: 46
- 应助: 257 (大学生)
- 贵宾: 0.272
- 金币: 19454.4
- 散金: 1704
- 红花: 121
- 帖子: 6586
- 在线: 2777.2小时
- 虫号: 856414
- 注册: 2009-09-25
- 性别: GG
- 专业: 环境微生物学
- 管辖: 微生物
★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+3):淀粉酶，很热心~ 2010-08-11 18:03:37
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+3):淀粉酶，很热心~ 2010-08-11 18:03:37
|
有标签，亲和层析还有很多杂带就少见了。建议考虑下换标签，例如his-tag。 不建议像2楼说的用SDS-PAGE来做蛋白质回收，用SDS FREE的，不用做复性了，复性不是每个蛋白质都容易做得出来的。如果你的蛋白质表现出来的活性易于鉴别的的，可以考虑切胶洗脱。 3楼说的分子筛，如果是预装柱，上样量一般推荐为柱床体积的1%，这样要获得足够蛋白质就必须要极浓的蛋白质。而且过柱时流速推荐不大于1毫升每分钟，加上平衡和完事后洗柱保存，时间投入极大。不如先试一下离子交换，低盐上样高盐洗脱的，盐离子不高的话，很多蛋白质都没事，而且流速可高达5毫升每分钟。如果高盐也可耐受，还可以做疏水层析。 如果不行，就换标签his吧，省事。 |
4楼2010-08-11 14:38:52
20