24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 3396  |  回复: 4

nestzhao

木虫 (小有名气)


[交流] 【求助/交流】如何提高质粒拷贝数

最近提取质粒,提取的质粒的浓度总是不高,导致连接无法进行或者失败,想提高质粒的拷贝数。
据说,在菌体培养时加入氯霉素,可以提高质粒的拷贝数,但不知道该如何处理。

所以向大家请教一下,氯霉素该如何加入,加入量是多少?
其他还有没有什么方法可以提高质粒的拷贝数?
我需要的质粒是pET28b。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

» 抢金币啦!回帖就可以得到:

查看全部散金贴

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

最爱花诗雨

金虫 (正式写手)


★ ★
scelab(金币+2):谢谢交流 2010-12-17 12:04:08
nestzhao(金币+1): 2010-12-17 12:21:13
楼主有没有查过呢?
提高质粒拷贝数就那么几种方法和解释~~
http://bbs.ebiotrade.com/showtopic-8837.aspx
随便百度的,希望对你有用
只要不影响使用就行了

[ Last edited by 最爱花诗雨 on 2010-12-17 at 11:31 ]
2楼2010-12-17 11:30:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ben1147

木虫 (正式写手)


★ ★
scelab(金币+2):这主意不错 2010-12-17 12:04:18
nestzhao(金币+1): 2010-12-17 12:21:17
pET不是克隆质粒,本身拷贝数不是太高
人为单方面提高治理拷贝数可能导致质粒结构异常或者在菌体内稳定性下降
与其加氯霉素什么的那么麻烦,不如直接多提几管,合并到一起再沉淀浓度就高了么,或者中提大提都行
3楼2010-12-17 11:59:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gongeleven

铁杆木虫 (正式写手)


据说可以换复制子
4楼2010-12-17 15:01:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dandan20088810

金虫 (初入文坛)


引用回帖:
Originally posted by ben1147 at 2010-12-17 11:59:18:
pET不是克隆质粒,本身拷贝数不是太高
人为单方面提高治理拷贝数可能导致质粒结构异常或者在菌体内稳定性下降
与其加氯霉素什么的那么麻烦,不如直接多提几管,合并到一起再沉淀浓度就高了么,或者中提大提都行

同意楼上的说法,只是做连接,多提几管,溶解时少加点水,或多加水浓缩
5楼2010-12-17 15:48:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 nestzhao 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿苏州大学材料工程(085601)专硕有科研经历三项国奖两个实用型专利一项省级立项 +10 大火山小火山 2026-04-05 10/500 2026-04-05 19:58 by 小蜗牛小蜗牛
[考研] 313求调剂 +5 海日海日 2026-04-04 7/350 2026-04-05 13:58 by imissbao
[考研] 294求调剂 +6 Grey_Ey 2026-04-02 9/450 2026-04-04 22:07 by hemengdong
[考研] 一志愿211,化学学硕,310分,本科重点双非,求调剂 +11 努力奋斗112 2026-04-04 11/550 2026-04-04 20:51 by 蓝云思雨
[考研] +5 雾与海 2026-04-02 6/300 2026-04-04 19:53 by 蓝云思雨
[考研] 348分环境工程·调剂 +10 吴彦祖24k 2026-04-03 11/550 2026-04-04 14:19 by 无际的草原
[考研] 281求调剂 +10 aaawhy 2026-04-03 10/500 2026-04-03 21:42 by lbsjt
[考研] 266求调剂 +18 阳阳哇塞 2026-04-01 18/900 2026-04-03 18:38 by zllcz
[考研] 一志愿南昌大学324求调剂 +13 hanamiko 2026-04-01 13/650 2026-04-03 18:30 by ls刘帅
[考研] 315分 085602 求调剂 +15 26考研上岸版26 2026-04-02 15/750 2026-04-03 12:45 by xingguangj
[考研] 土木水利328分求调剂 +6 疾风知劲草666 2026-04-02 6/300 2026-04-03 11:38 by znian
[考研] 282求调剂 +13 呼吸都是减肥 2026-04-01 13/650 2026-04-02 14:10 by baoball
[考研] 一志愿北交大材料工程总分358 +3 cs0106 2026-04-02 5/250 2026-04-02 11:37 by olim
[考研] 07生物学求调剂 一志愿同济大学359分 +3 LAMC. 2026-03-30 3/150 2026-04-02 10:26 by 18828373951
[考研] 材料求调剂 +10 呢呢妮妮 2026-04-01 13/650 2026-04-02 09:17 by olim
[考研] 一志愿北交大材料工程,总分358 +4 cs0106 2026-04-01 4/200 2026-04-02 07:42 by 尚水阁主
[考研] 一志愿西安交大材料学硕(英一数二)347,求调剂到高分子/材料相关专业 +7 zju51 2026-03-31 9/450 2026-04-01 19:35 by CFQZAFU
[硕博家园] 考研调剂 +5 骆驼男人 2026-04-01 5/250 2026-04-01 14:28 by syjjj0321
[考研] 一志愿中海洋材料357 +4 麦恩莉. 2026-03-30 4/200 2026-03-31 14:35 by 记事本2026
[考研] 297 地理学070500 复试求调剂 +3 小圆圈圈ooo 2026-03-30 3/150 2026-03-30 21:05 by 余震yz
信息提示
请填处理意见