应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】如何提高质粒拷贝数
51/1返回列表
查看: 3644  |  回复: 4
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

nestzhao

木虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】如何提高质粒拷贝数

最近提取质粒，提取的质粒的浓度总是不高，导致连接无法进行或者失败，想提高质粒的拷贝数。
据说，在菌体培养时加入氯霉素，可以提高质粒的拷贝数，但不知道该如何处理。

所以向大家请教一下，氯霉素该如何加入，加入量是多少？
其他还有没有什么方法可以提高质粒的拷贝数？
我需要的质粒是pET28b。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2010-12-17 11:16:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

最爱花诗雨

金虫 (正式写手)
★ ★
scelab(金币+2):谢谢交流 2010-12-17 12:04:08
nestzhao(金币+1): 2010-12-17 12:21:13
楼主有没有查过呢？
提高质粒拷贝数就那么几种方法和解释~~
http://bbs.ebiotrade.com/showtopic-8837.aspx
随便百度的，希望对你有用
只要不影响使用就行了

[ Last edited by 最爱花诗雨 on 2010-12-17 at 11:31 ]
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2010-12-17 11:30:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ben1147

木虫 (正式写手)
★ ★
scelab(金币+2):这主意不错 2010-12-17 12:04:18
nestzhao(金币+1): 2010-12-17 12:21:17
pET不是克隆质粒，本身拷贝数不是太高
人为单方面提高治理拷贝数可能导致质粒结构异常或者在菌体内稳定性下降
与其加氯霉素什么的那么麻烦，不如直接多提几管，合并到一起再沉淀浓度就高了么，或者中提大提都行
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2010-12-17 11:59:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gongeleven

铁杆木虫 (正式写手)
据说可以换复制子
赞一下 回复此楼
4楼2010-12-17 15:01:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dandan20088810

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by ben1147 at 2010-12-17 11:59:18:
pET不是克隆质粒，本身拷贝数不是太高
人为单方面提高治理拷贝数可能导致质粒结构异常或者在菌体内稳定性下降
与其加氯霉素什么的那么麻烦，不如直接多提几管，合并到一起再沉淀浓度就高了么，或者中提大提都行

同意楼上的说法，只是做连接，多提几管，溶解时少加点水，或多加水浓缩
赞一下 回复此楼
5楼2010-12-17 15:48:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 nestzhao 的主题更新
51/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 投票:  有多少人是今天查系统知道结果的？ +15 爱看书的可乐 2026-08-26 17/850 2026-08-27 03:31 by xxniao123
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 LIbGuocjEEYw 2026-08-26 4/200 2026-08-27 02:01 by Ie9AyIAvGbvs
[基金申请] 2026年的国家社科基金项目通讯评审的新规则与新动向、新挑战 +7 process2012 2026-08-23 10/500 2026-08-26 19:23 by hmhminy
[基金申请] 系统查不到 +10 董八千 2026-08-26 10/500 2026-08-26 16:30 by Equinoxhua
[基金申请] 怎么查啊 +5 huang1991js 2026-08-26 5/250 2026-08-26 16:09 by Equinoxhua
[基金申请] 2026国自然函评费到账 +22 羊腰板 2026-08-21 25/1250 2026-08-26 15:00 by zuocuiping
[基金申请] 2026年8月25日国自然放榜前突然收到列入评审专家邮件，有关系吗？ +25 木水思豆 2026-08-25 28/1400 2026-08-26 14:53 by draco1987
[基金申请] 能否退出参与的面上项目解除限项 +23 koalala 2026-08-24 26/1300 2026-08-26 14:29 by 宝贝虫子
[基金申请] 哪位高人中了，把查询到的截图贴出来让我看看，让我长长见识 +4 yuleib84 2026-08-26 5/250 2026-08-26 13:40 by yuleib84
[基金申请] 科研孤儿太难了 +21 我4大白菜 2026-08-20 22/1100 2026-08-26 11:29 by nlgza
[基金申请] 国合里面能看到了 +7 一怀馨秋 2026-08-26 7/350 2026-08-26 11:23 by zhaosm1982
[基金申请] 国际合作可查了，中了面上 +18 Ldrop2023 2026-08-26 18/900 2026-08-26 11:15 by cmrandy
[基金申请] 怎么看青基中了没有啊 +4 叶九微 2026-08-26 4/200 2026-08-26 10:52 by xiacongxu
[基金申请] 国合可查了 +3 paperzjh 2026-08-26 3/150 2026-08-26 10:41 by LemmonTr
[基金申请] 国合现在查不到了吗？ +10 chengyan1220 2026-08-24 20/1000 2026-08-26 08:57 by peasantsprig
[基金申请] 如果此刻你正在为国基感到焦虑，不妨来听听这首《基金之外》 +8 scalable 2026-08-24 8/400 2026-08-25 12:52 by jnhyjjm
[基金申请] 没有任何消息-是不是就凉了 +9 图啦图啦 2026-08-24 10/500 2026-08-25 11:59 by 南海小哥
[基金申请] 人气不行了 +11 fansofjerry 2026-08-21 11/550 2026-08-25 11:04 by 孤独的英雄6
[基金申请] 我面上完蛋了 +13 且听虎啸 2026-08-20 14/700 2026-08-25 09:10 by mrkang
[基金申请] 时间戳今天，20号变了 +5 archvillain 2026-08-20 5/250 2026-08-22 06:12 by hui_daxiao
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭