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yp90

金虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】关于PCR 已有6人参与

这两天在做16s,总是p不出来,用的基因组DNA,按说DNA提的质量应该没问题,下面是PCR后的图,目的条带大概1500bp,应该在从下往上第4个maker附近,模板用了1ul,5ul,10倍稀释,20倍稀释以及100倍稀释,都出不来,总是这种模模糊糊的状态,请高手支招吧,实在没辙了。
对了,试剂和引物应该都没问题(引物是地球人都用的,捎带退火温度也就没问题了,试剂别人用着没问题)。
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ymzfeng

金虫 (小有名气)

yp90(金币+1): 2010-08-09 11:43:21
引用回帖:
Originally posted by yp90 at 2010-08-09 09:19:06:
阳性对照之前做过一次,没问题的。这次就没做。

每次操作的手法和外界条件都不一样,还是要有对照好说明问题些
7楼2010-08-09 09:23:44
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

yp90(金币+1): 2010-08-09 23:22:00
用的什么公司的酶?
2楼2010-08-09 08:49:01
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yp90

金虫 (正式写手)

promega 的taq 酶。
3楼2010-08-09 08:51:21
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ymzfeng

金虫 (小有名气)

yp90(金币+1): 2010-08-09 09:18:27
有对照不?阳性对照跑得出不了
不知你的体系和反应条件是怎样的
4楼2010-08-09 09:06:57
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