应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】连接表达载体
51/1返回列表
查看: 1016  |  回复: 11
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

虫虫6527

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】连接表达载体 已有10人参与

我的目的片段连接表达载体，目的片段两端加了保护碱基，直接用PCR产物回收做双酶切，连接，可是一直连不上。有人建议我连到T载体上再切下来，再做连接。这样做效果好吗？还是有什么别的办法？请各位指教。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2010-07-22 08:51:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

周_yan

木虫 (小有名气)
可能与你的保护碱基有关，也可能酶切位点有关，有的酶容易发生碱基化而导致切不开。
赞一下 回复此楼
9楼2010-07-26 11:26:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答

lwiaanngg

铁杆木虫 (著名写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
1949stone(金币+1):谢谢交流 2010-07-22 12:35:25
用T载体效果会好点，至少你知道你两端已经都被切开。
直接双酶切你并不知道酶切效果，而且和你的保护碱基设计有关
赞一下(2人) 回复此楼
2楼2010-07-22 09:59:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhaohq1209

铁杆木虫 (著名写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
1949stone(金币+1):谢谢交流 2010-07-22 12:35:34
PCR产物直接回收做酶切与T载体酶切相比效果要差，建议lz还是用T载体比较保险。
赞一下(2人) 回复此楼
我有一个梦想，我梦想有一天，我们的人民可以根据自己的意愿与消费能力，居住在自己愿意居住的地方。
3楼2010-07-22 10:29:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

louli

铜虫 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
1949stone(金币+1):谢谢交流 2010-07-22 12:35:41
换一下酶切位点吧 我就没连T载体上，饿哦是直接切得，效果也挺好的。
赞一下(2人) 回复此楼
4楼2010-07-22 10:34:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭