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虫虫6527

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】PCR已有10人参与

我做PCR出来引物带，可能是什么问题？
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1楼2010-07-19 09:19:22
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amilie030312

金虫 (正式写手)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+2):感谢交流~~ 2010-07-19 18:00:02
是引物二聚体，如果是做普通PCR则不用管，切胶就去掉了，也可以降低引物浓度，但只能降低引物二聚体形成的量，不能全部去除。如果是做染料法的定量可以用溶解曲线去除引物二聚体形成的荧光值。
原则上讲有引物二聚体则说明引物不合格，需要重新设计引物。
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7楼2010-07-19 15:13:20
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ilxly

木虫 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
1949stone(金币+1):正解 2010-07-19 10:04:01
引物自己配对结合扩增了
赞一下(2人) 回复此楼
2楼2010-07-19 09:23:10
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aofeng860308

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by 虫虫6527 at 2010-07-19 09:19:22:
我做PCR出来引物带，可能是什么问题？

这个问题说不清楚了，影响因素多！
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3楼2010-07-19 09:25:37
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zhaohq1209

铁杆木虫 (著名写手)
★
看天(金币+1):热心的斑斑 2010-07-19 12:59:59
减少引物用量；提高退火温度；或者将引物混合后94度加热后再加入反应体系中。
祝好运！
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我有一个梦想，我梦想有一天，我们的人民可以根据自己的意愿与消费能力，居住在自己愿意居住的地方。
4楼2010-07-19 10:13:26
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