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pcr条带一直弥散 已有1人参与
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做的是昆虫肠道细菌的pcr 每次pcr完条带都是非常弥散 体系： 总共50ul 加premix taq 25ul 、上下游引物各1ul （浓度10uM）8F 与926R BSA 0.5ul 模版根据浓度加量 补无菌水至50ul pcr过程：94度3min 94度30s 56度 45s 72度2min 循环35次 最后72度延伸3min 。退火温度从51-59度相差一度梯度试过 循环次数25 30 35 40 都试过 引物浓度也试过 2uM 8uM 模版量5 10 15 20 30 40ng都试过 还是弥散 差距只有弥散的程度大小和上下位置以及亮度 已经无能为力了 做了半年了 求大神指导 图片前四个是DNA电泳条带 后四个就是pcr后弥散的条带 @biostar2009 @飞约疯人院 发自小木虫IOS客户端 |
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zhouxfd
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