应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 求助pcr 问题 急急急，拜托了
201/2返回列表12下一页
查看: 1515  |  回复: 19
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

小点心

铁虫 (初入文坛)

[求助] 求助pcr 问题 急急急，拜托了

最近做PCR总是出现弥散条带，以前做的时候都没有出现过 但是最近只要做一次就会出现弥散，请大家帮帮我，看看是什么原因啊


还有我做的是25微升体系
mix：12.5
引物：1
酶：0.25
模板：1


拜托大家了  很急哎

以前做的pcr



最近一直做的pcr
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2012-04-26 22:32:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

孙启亮

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
重新购买一批新的试剂试试，你体系没变，不好分析
赞一下 回复此楼
2楼2012-04-26 23:02:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liukun261

禁虫 (小有名气)
★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-04-27 13:52:25
本帖内容被屏蔽
3楼2012-04-26 23:17:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

凌波丽

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助 2012-04-27 13:52:38
可能是是专一性扩增不够。措施：适当降低taq酶浓度；增加退火温度；缩短退火时间；降低镁离子浓度；减少循环；降低引物浓度；可以考虑加入少量BSA。
赞一下 回复此楼
4楼2012-04-27 00:37:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

adili

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
重新配制电泳液，并优化一下体系，DNA用上2或2.5试试
赞一下 回复此楼
耐心，细心，信心缺一不可
5楼2012-04-27 00:42:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

huiee

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-04-27 13:52:54
ladder跑的很好 说明agrose gel体系没问题
只能在PCR体系找原因。
赞一下 回复此楼
6楼2012-04-27 03:00:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小点心

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 孙启亮 at 2012-04-26 23:02:39:
重新购买一批新的试剂试试，你体系没变，不好分析

做50 微升也是一样啊
赞一下 回复此楼
7楼2012-04-27 10:23:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小点心

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by adili at 2012-04-27 00:42:21:
重新配制电泳液，并优化一下体系，DNA用上2或2.5试试

我也有把DNA 加到2唉，但是也不行  空白也会有弥散，是污染了还是别的问题啊
赞一下 回复此楼
8楼2012-04-27 10:24:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小点心

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 凌波丽 at 2012-04-27 00:37:59:
可能是是专一性扩增不够。措施：适当降低taq酶浓度；增加退火温度；缩短退火时间；降低镁离子浓度；减少循环；降低引物浓度；可以考虑加入少量BSA。

这样啊，我试试看吧 谢谢
赞一下 回复此楼
9楼2012-04-27 10:25:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小点心

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by huiee at 2012-04-27 03:00:49:
ladder跑的很好 说明agrose gel体系没问题
只能在PCR体系找原因。

怎么在体系上找原因啊
赞一下 回复此楼
10楼2012-04-27 10:26:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 小点心 的主题更新
201/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 化学工程321分求调剂 +7 大米饭！ 2026-03-15 7/350 2026-03-16 10:25 by 了了了了。。
[考研] 326求调剂 +3 mlpqaz03 2026-03-15 3/150 2026-03-16 07:33 by Iveryant
[考研] 274求调剂 +4 时间点 2026-03-13 4/200 2026-03-15 15:29 by Rambo13
[考研] 一志愿天津大学，英一数二305分求调剂，四六级已过 +8 小小番的茄 2026-03-09 8/400 2026-03-14 01:53 by JourneyLucky
[考研] 环境调剂 +6 晓看天暮看云 2026-03-09 6/300 2026-03-14 01:16 by JourneyLucky
[考研] 考研材料与化工，求调剂 +8 戏精丹丹丹 2026-03-09 8/400 2026-03-14 01:14 by JourneyLucky
[考研] 一志愿华中农业大学071010，总分三百二,求调剂 +3 困困困困坤坤 2026-03-10 3/150 2026-03-14 00:35 by JourneyLucky
[考研] 2026考研调剂+本科延边大学+山东大学+生物化学与分子生物学+有项目经验 +3 ccdsscjy 2026-03-10 3/150 2026-03-14 00:12 by JourneyLucky
[考研] 279求调剂 +3 抓着星星的女孩 2026-03-10 3/150 2026-03-13 23:47 by userper
[考研] 0703化学调剂 +4 快乐的香蕉 2026-03-11 4/200 2026-03-13 22:41 by JourneyLucky
[考研] （081700）化学工程与技术-298分求调剂 +12 11啦啦啦 2026-03-11 35/1750 2026-03-13 21:25 by JourneyLucky
[考研] 26调剂/材料科学与工程/总分295/求收留 +9 2026调剂侠 2026-03-12 9/450 2026-03-13 20:46 by 18595523086
[考研] 材料与化工085600调剂求老师收留 +9 jiaanl 2026-03-11 9/450 2026-03-13 20:22 by JourneyLucky
[考研] 293求调剂 +3 世界首富 2026-03-11 3/150 2026-03-13 16:27 by JourneyLucky
[考研] 【0856】化学工程（085602）313 分，本科学科评估A类院校化学工程与工艺，诚求调剂 +7 小刘快快上岸 2026-03-11 7/350 2026-03-13 16:06 by ruiyingmiao
[考研] 296求调剂 +3 大口吃饭 身体健 2026-03-13 3/150 2026-03-13 10:31 by 学员8dgXkO
[考研] 一志愿河海大学085900土木水利专硕279求调剂不挑专业 +4 SunWwWwWw 2026-03-10 8/400 2026-03-13 02:23 by SunWwWwWw
[考博] 2026年博士申请 +3 QwQwQW10 2026-03-11 3/150 2026-03-12 17:58 by gxch43
[考研] 一志愿江南大学085701环境工程专硕总分287求调剂 +5 18266118446 2026-03-09 5/250 2026-03-11 16:51 by 2020015
[考研] 290求调剂 +3 柯淮然 2026-03-10 8/400 2026-03-11 13:48 by 柯淮然
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭