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基因构建到表达载体上一直检测不到过表达 已有4人参与
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| 今年上半年购买了一个基因的克隆载体,然后交给外包公司,让他们把CDS序列连接到表达载体上面,目的基因N端加了一小段柔性肽和HA标签,后面通过包装慢病毒感染细胞,一直不能检测到HA,换了蛋白本身的的抗体也检测不到蛋白,细胞内和细胞外都没有,想请问一下这个过表达体系是不是哪里缺少东西出了问题? 之后老师建议把克隆载体直接转染到细胞当中,这样能表达蛋白么,还是应该把构建好的表达载体转染到细胞当中? |
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4楼2016-10-09 12:53:44
kangaroo0513
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