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构建植物表达载体,GUS或GFP对目的基因的功能是否有影响?
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大家好,最近我要构建植物过表达载体然后转化到拟南芥中进行基因功能验证,但是现在遇到了一个疑惑。在构建植物表达载体的时候,如果将目的基因连上GUS或GFP构建植物表达载体,是否会对目的基因的功能产生影响?我查了查资料, (1)有的说可以。 (2)有的说将GUS或GFP连到目的基因N端和C端对目的基因的功能影响不同。但我想问,在转基因之前,具体怎样做才能判断出来? (3)有人说可以在目的基因后面加上终止密码子,使后面的GUS或GFP基因不表达。但我有一个疑惑,终止密码子和终止子的距离增加了是否会对目的基因的翻译及时终止产生影响? 请各位高手帮忙解答一下,不胜感激! |
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