应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 第一次做荧光PCR，一直失败
181/2返回列表12下一页
查看: 1956  |  回复: 17
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

5566589

新虫 (初入文坛)

[求助] 第一次做荧光PCR，一直失败 已有5人参与

我们组只有我一个做荧光PCR的，第一次做空白的水也有扩增曲线，如图。。。求问是因为引物有二聚体吗
Amplification Plot.jpg
Melt Curve.jpg

第一次做荧光PCR，一直失败
Amplification Plot.jpg


第一次做荧光PCR，一直失败-1
Melt Curve.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2016-04-27 19:56:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

5566589

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 卡维斯 at 2016-04-27 21:23:29
水最好用荧光染料试剂盒中自带的Rnase-free的水，如果有污染也会出现这样的情况。另外溶解曲线单峰型没有，引物特异性不高，建议重设计引物

谢谢谢谢，水就是自带的，我再换个引物试试

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2016-04-27 21:41:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

XLK2011

木虫 (正式写手)
引用回帖:
14楼: Originally posted by lianfeng1107 at 2016-04-29 16:46:01
说到水，强烈推荐TAKARA公司 的Dilution buffer，荧光定量神水。

这个dilution buffer是单独卖的吗？

发自小木虫Android客户端
赞一下(1人) 回复此楼
15楼2016-05-01 10:44:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

卡维斯

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
水最好用荧光染料试剂盒中自带的Rnase-free的水，如果有污染也会出现这样的情况。另外溶解曲线单峰型没有，引物特异性不高，建议重设计引物
赞一下 回复此楼
2楼2016-04-27 21:23:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

z631535213

木虫 (正式写手)
用的ROX还是什么啊，学习中

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
4楼2016-04-27 23:08:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

5566589

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by z631535213 at 2016-04-27 23:08:19
用的ROX还是什么啊，学习中

SYBR
回复此楼
5楼2016-04-28 10:24:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

star013

新虫 (知名作家)
我们可以做荧光定量技术服务

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
6楼2016-04-28 13:38:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

许欧阳紫儿

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
有引物二聚体，引物要重新设计，水也有曲线的话一般是气融胶污染，建议枪专用

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
7楼2016-04-28 14:35:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

许彦

木虫 (正式写手)
实验室环境有问题吧，是不是实验室做过类似的普通pcr有过开盖。

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
8楼2016-04-28 15:59:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

许彦

木虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by z631535213 at 2016-04-27 23:08:19
用的ROX还是什么啊，学习中

这个机器应该是7500，rox是7500的校准荧光。

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
9楼2016-04-28 16:00:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

781055707

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你用的是千倍稀释的SYBR，这个不常用的呀，一般都要设计一条荧光引物如ROX，FAM，VIC。用SYBR都不准的，你阴性CT22，那阳新多少，15左右吗？
赞一下 回复此楼
采菊东篱下，悠然见南山。
10楼2016-04-28 16:01:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 5566589 的主题更新
181/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭