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修香恋

铜虫 (小有名气)

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专业: 植物生理与生化

[求助] 用荧光定量PCR鉴定转基因植株的基因表达量，野生型比超表达的表达量高

最近在验证转基因水稻的基因表达量，第一次验证的结果是超表达植株的表达量比野生型的高，但是第二次做的时候就是野生型的表达量比超表达植株的表达高。两次的材料是同一株系的不同单株，是分两批种的。求大神指教原因，感激不尽！

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1楼 2014-10-22 10:44:16

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twotf

新虫 (小有名气)

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专业: 植物保护生物技术

从技术方面，引物不知道是是否特异。如果能扩初其他基因或者同一基因家族其他成员，则结果不可靠。这可以通过看熔解曲线来判断，如果扩增出其他基因会出现杂峰，如果引物二聚体较多，也能看见杂峰。
从实验设计上，所用的植物材料是不是有你所研究基因的本底。如果有的话，野生型比转基因植株表达量高的情况也不是不能发生，只不过这种情况概率低。

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2楼2014-10-22 16:40:50

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