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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 第一次做荧光PCR，一直失败
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z631535213

木虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 许欧阳紫儿 at 2016-04-28 14:35:47
有引物二聚体，引物要重新设计，水也有曲线的话一般是气融胶污染，建议枪专用

气溶胶咋处理啊？

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11楼2016-04-28 18:52:13
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haofeng0804

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
MIQE (Minimum Information for Publication of Quantitative Real-Time PCR Experiments)
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12楼2016-04-28 22:05:45
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美亿美生物

捐助贵宾 (职业作家)

技术服务-实验代做
话说，现在这个试验可以直接找公司做，快又好

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13楼2016-04-28 22:39:19
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lianfeng1107

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
说到水，强烈推荐TAKARA公司 的Dilution buffer，荧光定量神水。
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14楼2016-04-29 16:46:01
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XLK2011

木虫 (正式写手)
引用回帖:
14楼: Originally posted by lianfeng1107 at 2016-04-29 16:46:01
说到水，强烈推荐TAKARA公司 的Dilution buffer，荧光定量神水。

这个dilution buffer是单独卖的吗？

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15楼2016-05-01 10:44:29
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solomon7811

新虫 (小有名气)
SYBR荧光PCR对引物设计要求比较高。溶解曲线貌似双峰，前一个峰感觉像是二聚体的，后一个峰值还是很高的感觉不像二聚体。且CT值还是很小的。建议调整下引物和SYBR的浓度看看。

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16楼2016-05-01 11:23:57
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wx3280065

银虫 (小有名气)
是不是有气溶胶，核酸提取，反转录和定量要分开做，如果用一套东西做可能出现气溶胶，最好把枪真空抽一下

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17楼2016-05-01 12:50:54
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lianfeng1107

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
15楼: Originally posted by XLK2011 at 2016-05-01 10:44:29
这个dilution buffer是单独卖的吗？
...

对的。直接找他们电话买就可以了，不过好像这个货还挺紧俏。
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18楼2016-05-01 16:48:15
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